Product Description
Frasco de tampón de bloqueo de 500 ml. Requiere solo 5 minutos de bloqueo para todas las pruebas Western blot y elimina el tiempo de incubación en ensayos ELISA.
Descripción general
El tampón de bloqueo EveryBlot proporciona un bloqueo de 5 minutos y la máxima sensibilidad para todos los Western blots, independientemente del método de detección. Este tampón de bloqueo versátil es compatible con aplicaciones ELISA directas e indirectas. No requiere tiempo de incubación, eliminando el paso tradicional de incubación de 1 hora y manteniendo la alta sensibilidad de los ensayos ELISA.
Características y beneficios
• Reduce la unión de anticuerpos no específicos para reducir el fondo manteniendo al mismo tiempo una excelente sensibilidad.
• Para detección tanto quimioluminiscente como fluorescente.
• No contiene tampones a base de fosfato. Ideal para usar con anticuerpos fosfoespecíficos.
• Compatible con ensayos ELISA sándwich e indirectos
• Bloqueo rápido: 5 minutos para Western Blots y 0 minutos para ensayos ELISA
Protocolo recomendado
Para blots de tamaño mini, utilice al menos 10 ml para los pasos de bloqueo e incubación de anticuerpos. Para blots de tamaño mediano, utilice al menos 20 ml.
• Añadir el bloque a la membrana e incubar durante 5 minutos con agitación.
• Diluir los anticuerpos primarios y secundarios en un bloque de concentración completa e incubar durante 1 hora con agitación.
Para la detección fluorescente en PVDF, agregue SDS al 0,02 % en la solución de anticuerpo secundario.
¡NUEVO! Descargue el tampón de bloqueo EveryBlot para protocolos de ensayos ELISA:
• Buffer de bloqueo EveryBlot para protocolo ELISA indirecto
• Tampón de bloqueo EveryBlot para protocolo ELISA tipo sándwich
Ensayos ELISA
ELISA indirecta
ELISA tipo sándwich
Comparación del tampón de bloqueo. El tampón de bloqueo EveryBlot y el tampón de bloqueo ELISA BSA Block estándar o el tampón de bloqueo ELISA de la competencia mostraron resultados comparables con buenos coeficientes de correlación.
Detección fluorescente
Detección multiplex fluorescente en células HEK293. Tras la electroforesis, las proteínas se transfirieron a PVDF de baja fluorescencia. A la izquierda, el blot se bloqueó en un bloqueador optimizado para fluorescencia durante 1 hora. A la derecha, el blot se bloqueó en el tampón de bloqueo EveryBlot durante 5 minutos. Tras el bloqueo, ambos blots se procesaron de forma idéntica y se obtuvieron imágenes para maximizar la señal y minimizar el fondo de cada canal de forma independiente.
Detección quimioluminiscente
Detección quimioluminiscente de tres dianas en células HEK 293. Tras el bloqueo, ambas manchas se procesaron de forma idéntica y se visualizaron con parámetros idénticos.
Detección de fosfoproteínas
Nada que interfiera con la detección de fosfoproteínas. Detección de dianas totales (verde) y fosfoespecíficas (rojas). Izquierda: células Jurkat no estimuladas (–) o estimuladas (+) con caliculina A. Centro y derecha: células A431 no estimuladas (–) o estimuladas (+) con EGF.
Bajo nivel de fondo en todo el espectro
Efecto del agente bloqueante sobre el fondo de la membrana. Membranas de PVDF de baja fluorescencia sin muestra ni anticuerpos, bloqueadas en un tampón de bloqueo optimizado para fluorescencia o en el tampón de bloqueo EveryBlot. Tras el lavado, se obtuvieron imágenes de las membranas en paralelo en el sistema de imágenes ChemiDoc MP. Se midió la autofluorescencia de la membrana en cada canal fluorescente. Tampón de otro fabricante ( ); tampón EveryBlot ( ).
Opciones de embalaje
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Documentos de respaldo
• Volante del búfer de bloqueo EveryBlot
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