Bio-Rad, 1632090, Kit de reducción-alquilación ReadyPrep™, 100 preparaciones

100 preparaciones, incluye 3 viales de vidrio vacíos de 0,6 ml de TBP 200 mM, 3 viales de vidrio vacíos para almacenar TBP, 5 viales de 56 mg de yodoacetamida, 2 ml de tampón de alquilación, manual de instrucciones; para 100 muestras de 300 µl que contienen hasta 10 mg/ml de proteína
Descripción general
Elija el kit de reducción-alquilación ReadyPrep para reducir los enlaces disulfuro y bloquear su formación en muestras de isoelectroenfoque (IEF). El kit contiene tributilfosfina (TBP) para reducir los enlaces disulfuro intramoleculares e intermoleculares, y yodoacetamida para alquilar los tioles.
• Mejorar la resolución y reproducibilidad del IEF
• Eliminar la formación de enlaces disulfuro durante la IEF
• Obtenga un patrón de puntos consistente y minimice las rayas y la migración aberrante de puntos
• Úselo directamente en el tampón de rehidratación/muestra; se completa en menos de 2 horas, con muy poco tiempo de manipulación.
• Compatible con otros kits de preparación de muestras y tampones ReadyPrep
El kit de reducción-alquilación ReadyPrep es un método sencillo y eficaz para mejorar los resultados de la electroforesis 2D. Muchos agentes reductores se cargan negativamente durante el isoelectroenfoque y migran de la tira de IPG. Además, el ditiotreitol (DTT), el agente reductor más utilizado, no es eficaz en condiciones ácidas. Se ha demostrado que el TBP es un agente reductor más eficaz que el DTT para la electroforesis en gel 2D. Además, la alquilación mejora la resolución de las proteínas básicas, que presentan una mayor tasa de formación de enlaces disulfuro en un entorno alcalino (Görg et al., 2000; Hoving et al., 2002).
La combinación de reducción con TBP y la alquilación posterior de los tioles con yodoacetamida es eficaz para reducir los enlaces disulfuro intramoleculares e intermoleculares y prevenir la reformación de enlaces disulfuro y la mezcla de disulfuros, lo que da como resultado una mayor resolución, una menor ambigüedad de puntos y una mayor reproducibilidad.
Componentes del kit
Para el tratamiento de 100 muestras, cada una de 300 µl contiene hasta 10 mg/ml de proteína
• TBP (200 mM), 0,6 ml, 3 ampollas
• Viales de vidrio vacíos para el almacenamiento de TBP después de abrir las ampollas, 3
• Yodoacetamida, 56 mg, 5 viales ámbar
• Tampón de alquilación, 2 ml
• Manual de instrucciones
Productos relacionados
• Kits ReadyPrep para fraccionamiento por ubicación celular
• Kits ReadyPrep para fraccionamiento por solubilidad
• Minikits de intercambio iónico Aurum™ para fraccionamiento por carga
• Celdas IEF de fase líquida Rotofor ® para fraccionamiento por pI
• Celda de preparación modelo 491 y minicelda de preparación para fraccionamiento por solubilidad
• Kit de inicio ReadyPrep™ 2-D
• Sistema IEF PROTEAN ® i12™
• Tiras IPG ReadyStrip™
• Fuente de alimentación de alto voltaje PowerPac™ HV
Categorías relacionadas
• Geles de proteína
• Cámaras de electroforesis
• Tampones y reactivos para electroforesis 2-D
• Anfolitos
• Sistemas IEF de gel en tubo
• Sistemas de imágenes en gel
• Flujo de trabajo de electroforesis 2-D
Documentación de apoyo
• Manual de instrucciones del kit de reducción-alquilación ReadyPrep
• Preparación de muestras: herramientas para la extracción, limpieza, fraccionamiento y agotamiento de muestras de proteínas (folleto)
• Manual de instrucciones de la tira IPG ReadyStrip
• Folleto del sistema PROTEAN i12 IEF
• Guía rápida del flujo de trabajo de la proteína de la célula huésped (HCP)
Referencias
Görg A et al. (2000). Estado actual de la electroforesis bidimensional con gradientes de pH inmovilizados. Electrophoresis 21, 1037–1053. PMID: 10786879. Hoving S et al. (2002). Electroforesis bidimensional preparativa en gel a pH alcalino utilizando gradientes de pH inmovilizados de rango estrecho. Proteomics 2, 127. PMID: 11840558.