Cobetter, 3550YH-F200, membranas de transferencia de PVDF de 0,2 μm para Western Blot

Consulte este producto con un tamaño de envase de 0,2 μm / 200 x 200 mm / 50 unidades/paquete en Iright. Las membranas de transferencia de PVDF Cobetter ofrecen alta sensibilidad y bajo fondo en Western blot. El tamaño de 0,45 μm es adecuado para la mayoría de las aplicaciones de Western blot y el de 0,2 μm para inmunotransferencia de proteínas de bajo peso molecular (PM) <20 kDa.
Presupuesto

Membrana
PVDF hidrofóbico
Tamaño de los poros

0,2 μm
0,45 μm

Espesor

130 μm
125 μm

Capacidad de unión a proteínas (BAS)

300 µg/cm²
135 µg/cm²

Dimensión
275 mm x 3,75 m
84 mm x 70 mm
150 mm x 150 mm
200 mm x 200 mm
Principales mecanismos de unión
Electrostático, hidrofóbico
Preactivación
Requiere etanol (metanol)
Tolerancia
Resistente a la mayoría de disolventes orgánicos, ácidos y bases débiles.
Compatibilidad
Compatible con condiciones de transferencia y métodos de detección comúnmente utilizados (como tinción, quimioluminiscencia, radiomarcado, etc.)
Almacenamiento
Guarde la membrana en posición horizontal a temperatura ambiente, alejada de vapores químicos. Algunos vapores de disolventes pueden disolver partes de la membrana, alterando así la estructura porosa.
Paquete
1 rollo/paquete o 50 piezas/paquete
Características
Superficie lisa y plana, no se curva ni se fractura al cortarla.
Alta resistencia mecánica, fácil de pelar y volver a pelar varias veces.
Tamaño de poro uniforme, alta movilidad de proteínas, bandas claras y ordenadas.
Alta sensibilidad y bajo fondo, garantizan la tasa de éxito en la detección de proteínas de baja abundancia.
Aplicaciones
Transferencia de proteínas
Detección de manchas
Análisis de adsorción
Rendimiento de la membrana de transferencia de PVDF
Precauciones
Evite que entren burbujas en el papel de filtro, el gel o la membrana.
Para muestras que contienen péptidos pequeños, el tiempo de equilibrio del gel en el tampón de transferencia debe limitarse a 10 minutos.
Cuando la proteína objetivo es menor o igual a 15 kDa, se puede utilizar una membrana de transferencia de PVDF de 0,2 μm para obtener la máxima retención.
La membrana de transferencia de PVDF solo se utiliza para investigación científica por parte de profesionales y no debe utilizarse para diagnóstico o tratamiento clínico, alimentos o medicamentos.
Para su seguridad y salud, utilice ropa de laboratorio y guantes desechables.
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¿Por qué las membranas de transferencia de PVDF son ideales para aplicaciones de Western Blot? P: ¿La membrana de transferencia de PVDF Cobetter tiene una cara frontal y una posterior? ¿Requiere activación antes de su uso?
Las membranas de transferencia de PVDF Cobetter tienen una superficie lisa y uniforme y no es necesario distinguir entre los lados frontal y posterior durante su uso.
Antes de usar, simplemente humedezca la membrana con etanol absoluto o metanol absoluto. Tras la activación, la membrana cambia de blanca y opaca a semitransparente. Se recomienda un tiempo de remojo de 30 a 60 segundos.
P: ¿Las membranas de transferencia de PVDF Cobetter están disponibles en tamaños precortados?
Las membranas de transferencia Cobetter están disponibles tanto en formato de rollo como en láminas precortadas en caja, para satisfacer diferentes necesidades experimentales.
Formato del rollo: 26,5 cm × 3,75 m
Hojas precortadas: 200 mm × 200 mm; 84 mm × 70 mm
P: ¿Cómo elegir el tamaño de poro apropiado de las membranas de transferencia de PVDF?
Seleccione la membrana de transferencia adecuada según el peso molecular de la proteína:
Proteínas pequeñas (<20 kDa): utilice una membrana de transferencia de PVDF de 0,2 µm
Proteínas grandes (>20 kDa): utilice una membrana de transferencia de PVDF de 0,45 µm
P: ¿Qué se debe tener en cuenta al realizar un Western blotting para una proteína de alto peso molecular (~200 kDa)?
Utilice un gel de resolución con un porcentaje más bajo, preferiblemente alrededor del 7%.
Manipule el gel con cuidado durante el desprendimiento/remoción para evitar dañarlo.
Amplíe el tiempo de transferencia para garantizar una transferencia de proteínas eficiente.
Incluya un marcador de peso molecular, de lo contrario, las bandas no específicas pueden ser difíciles de interpretar.
P: ¿Cómo deben establecerse las condiciones de transferencia para el Western blotting?
Para proteínas en el rango de 15 a 100 kDa, una condición típica es una corriente constante de 300 mA durante 45 minutos.
Para proteínas >100 kDa, generalmente se recomienda una corriente más baja (alrededor de 220 mA) con un tiempo de transferencia más largo.
Según la experiencia: ZO-1 (250 kDa) se puede transferir con éxito en 2,5 horas. Las proteínas de 150 kDa se pueden transferir en 1,5 horas.
Por ejemplo: si la proteína objetivo más grande es de 200 kDa, la condición de transferencia se puede estimar como: 220 mA × (200 / 150) ≈ 134 minutos, más ~15–20 minutos adicionales, lo que da como resultado un tiempo de transferencia total de aproximadamente 150 minutos.
P: ¿Cómo se puede reducir el fondo en la membrana Western blot de PVDF?
1. Asegúrese de que el bloqueo sea adecuado. Las membranas de PVDF requieren pasos de bloqueo más rigurosos. Esto se puede lograr aumentando la concentración del agente bloqueador de 2 a 5 veces, incrementando el tiempo de bloqueo y realizando el procedimiento a 37 °C.
2. Optimizar las proporciones de dilución de los anticuerpos primarios y secundarios puede reducir el fondo inespecífico.
3. Realice un lavado exhaustivo y mantenga la membrana continuamente húmeda y libre de contaminación durante todos los pasos.
P: ¿Cuáles son las ventajas de las membranas de transferencia de PVDF Cobetter?
1. Superficie lisa y plana, resistente al rizado.
2. Alta resistencia mecánica, lo que permite un fácil desmontaje y uso repetido.
3. Tamaño de poro uniforme y consistente, lo que permite una alta eficiencia de transferencia de proteínas y bandas nítidas y bien definidas.
4. Mayor sensibilidad, mejorando la tasa de éxito en la detección de proteínas de baja abundancia.
P: ¿Cómo se debe seleccionar el papel de filtro de celulosa para el Western blot?
El tamaño del papel de filtro debe ser ligeramente mayor que el gel y la membrana de transferencia de PVDF.
Los papeles de filtro de celulosa precortados Cobetter están diseñados para adaptarse a las membranas de transferencia de PVDF, ofreciendo un manejo cómodo y un ajuste óptimo.