CST, 10483S, Kit PTMScan® con motivo acetilo N-terminal [N-Ac]

PTMScan para estudiar en el área de investigación. Información de uso del producto Las células se lisan en un tampón con urea, las proteínas celulares se digieren mediante proteasas y los péptidos resultantes se purifican mediante extracción en fase sólida en fase reversa. A continuación, los péptidos se someten a purificación por inmunoafinidad utilizando un anticuerpo PTMScan® Motif conjugado con perlas de agarosa de proteína A. Los péptidos no unidos se eliminan mediante lavado y los péptidos capturados que contienen PTM se eluyen con ácido diluido. La purificación en fase reversa se realiza en micropuntas para desalinizar y separar los péptidos del anticuerpo antes de concentrar los péptidos enriquecidos para su análisis por LC-MS/MS. CST recomienda el uso del tampón PTMScan® IAP n.° 9993, incluido en el kit. Almacenamiento Las perlas de anticuerpo se suministran en tampón IAP con 50 % de glicerol. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: PTMScan Fondo Existen diversas formas de procesamiento proteico N-terminal en eucariotas que se dirigen al aminoácido metionina inicial. Una de estas modificaciones es la acetilación de la metionina N-terminal aceptada del acetil-CoA. Esta modificación está mediada por las acetiltransferasas N-terminales (Nats) y se ha encontrado presente en una amplia variedad de proteínas, estimándose que en algunos casos representa entre el 50% y más del 80%. Se han identificado seis Nats bien conservadas desde la levadura hasta los humanos (1). Esta modificación, ampliamente observada, se ha implicado en diversos procesos proteicos, desde la regulación de la traducción, la estabilidad, el plegamiento, la localización, el control transcripcional y las interacciones proteína-proteína. También desempeña un papel en las modificaciones de la cola de las histonas (2,3,4,5). Nombres alternativos acetilo; motivo; nac; nat