Anticuerpo monoclonal de conejo CST, 11974S, RNF20 (D6E10)

Anticuerpo monoclonal para el estudio de BRE1A. Validado para WB, IP, ChIP, C&R. Disponible en dos tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo RNF20 (D6E10) (CST n.° 11974) está listo para su envío. Información de uso del producto Para obtener resultados óptimos de ChIP, utilice 10 µl de anticuerpo y 10 µg de cromatina (aproximadamente 4 x 10⁻¹ células) por IP. Este anticuerpo se ha validado con los kits de IP de cromatina enzimática SimpleChIP®. La dilución CUT&RUN se determinó con el kit de ensayo CUT&RUN n.º 86652. Western Blot: 1:1000 Inmunoprecipitación: 1:200 IP de cromatina: 1:50 CORTE Y CORRE: 1:50 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunoprecipitación, IP de cromatina, CUT&RUN Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo monoclonal de conejo RNF20 (D6E10) reconoce los niveles endógenos de la proteína RNF20 total. Este anticuerpo reconoce una segunda banda de 80 kDa en lisados ​​de ratón, correspondiente a la isoforma 2 de RNF20 de ratón. Este anticuerpo no presenta reacción cruzada con la proteína RNF40. Reactividad de las especies: humano, ratón, rata, mono Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un péptido sintético correspondiente a los residuos que rodean Gly516 de la proteína RNF20 humana. Fondo En células de mamíferos, la importancia de la ubiquitinación de la histona H2B en la epigenética de la cromatina provino de la identificación de la proteína de levadura en gemación Bre1 (1,2). Junto con la enzima conjugadora de ubiquitina Rad6, Bre1 sirve como la ligasa E3 en la monoubiquitinación de la histona H2B de levadura dentro de las regiones transcritas de la cromatina (1-3). Subsecuentemente, los ortólogos mamíferos de la levadura Bre1, RNF20 y RNF40, fueron identificados (4,5). Estas dos proteínas forman un heterodímero apretado que actúa como la principal ligasa E3 responsable de la monoubiquitinación de la histona H2B en Lys120 en células de mamíferos, una modificación vinculada a la elongación de la transcripción dependiente de la ARN Pol II en células no dañadas. Los investigadores han demostrado que las roturas de doble cadena (DSB) del ADN también son capaces de inducir la monoubiquitinación de H2B. Este proceso depende del reclutamiento a los sitios DSB, así como de la fosforilación dependiente de ATM del heterodímero RNF20-RNF40, lo que destaca el papel de esta ligasa E3 en las vías de reparación de DSB (6). De hecho, investigadores han demostrado que la pérdida de la función de RNF20-RNF40 promueve el estrés replicativo y la inestabilidad cromosómica, lo que podría constituir un paso temprano en la transformación maligna que precede a la invasión celular (7). Nombres alternativos BRE1; homólogo de la ligasa de ubiquitina E3 de BRE1; BRE1-A; BRE1A; ligasa de proteína ubiquitina E3 BRE1A; FLJ11189; FLJ20382; hBRE1; homólogo de BRE1 de S. cerevisiae; KIAA2779; MGC129667; MGC129668; proteína de dedo RING 20; transferasa de ubiquitina E3 de tipo RING BRE1A; RNF20 Especificación REACTIVIDAD: HMR Mk SENSIBILIDAD: Endógena Peso molecular (kDa): 120 Fuente/Isotipo: IgG de conejo