Anticuerpo monoclonal de conejo CST, 12972S, HSF1 (D3L8I)

Anticuerpo monoclonal para el estudio de HSF1. Validado para WB, IP, IHC, IF, F, ChIP, ChIP, C&R, C&T. Disponible en dos tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo HSF1 (D3L8I) (CST n.° 12972) está listo para su envío. Información de uso del producto Para obtener resultados óptimos de ChIP y ChIP-seq, utilice 10 µl de anticuerpo y 10 µg de cromatina (aproximadamente 4 x 10⁻¹ células) por IP. Este anticuerpo se ha validado con los kits de IP de cromatina enzimática SimpleChIP®. La dilución CUT&RUN se determinó con el kit de ensayo CUT&RUN n.° 86652. La dilución CUT&Tag se determinó con el kit de ensayo CUT&Tag n.° 77552. Western Blot: 1:1000 Inmunoprecipitación: 1:50 Inmunohistoquímica (parafina): 1:250 - 1:1000 Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica): 1:200 - 1:400 Citometría de flujo (fijada/permeabilizada): 1:100 - 1:400 IP de cromatina: 1:50 IP-seq de cromatina: 1:50 CORTE Y CORRE: 1:50 Corte y etiquetado: 1:100 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Para obtener una versión sin transportador (BSA ni azida) de este producto, consulte el producto n.° 76196. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunoprecipitación, Inmunohistoquímica (Parafina), Inmunofluorescencia (Inmunocitoquímica), Citometría de flujo (Fijada/Permeabilizada), IP de cromatina, IP de cromatina-seq, CUT&RUN, CUT&Tag Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo monoclonal de conejo HSF1 (D3L8I) reconoce los niveles endógenos de la proteína HSF1 total. No se prevé que este anticuerpo presente reacción cruzada con HSF2. Reactividad de las especies: humano, ratón, rata, mono, bovino, perro, cerdo Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un péptido sintético correspondiente a los residuos cercanos al extremo carboxiterminal de la proteína HSF1 humana. Fondo Todos los organismos responden al aumento de las temperaturas y a otros estreses ambientales induciendo rápidamente la expresión de proteínas de choque térmico (HSP) altamente conservadas que sirven como chaperonas moleculares para replegar las proteínas desnaturalizadas y promover la degradación de las proteínas dañadas. La transcripción de genes de choque térmico está regulada por una familia de factores de choque térmico (HSF), activadores transcripcionales que se unen a los elementos de respuesta al choque térmico (HSE) ubicados aguas arriba de todos los genes de choque térmico (1). Los HSE están altamente conservados entre los organismos y contienen múltiples iteraciones adyacentes e inversas del motivo pentanucleótido 5'-nGAAn-3'. Los HSF están menos conservados y comparten solo un 40% de identidad de secuencia. Las células de vertebrados contienen cuatro proteínas HSF: HSF1, 2 y 4 son ubicuas, mientras que HSF3 solo se ha caracterizado en especies aviares. HSF1 induce la transcripción de genes de choque térmico en respuesta al calor, metales pesados ​​y agentes oxidativos, mientras que HSF2 está involucrado en la espermatogénesis y el desarrollo de células eritroides. HSF3 y HSF4 muestran funciones superpuestas con HSF1 y HSF2. La forma inactiva de HSF1 existe como un monómero que se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo, pero no se une al ADN (1,2). En respuesta al estrés, HSF1 se fosforila, forma homotrímeros, se une al ADN y activa la transcripción de genes de choque térmico (1,2). La actividad de HSF1 está regulada positivamente por la fosforilación de Ser419 por PLK1, que potencia la translocación nuclear, y la fosforilación de Ser230 por CaMKII, que potencia la transactivación (3,4). Alternativamente, la actividad de HSF1 es reprimida por la fosforilación de las serinas en 303 y 307 por GSK3 y ERK1, respectivamente, lo que conduce a la unión de la proteína 14-3-3 y al secuestro de HSF1 en el citoplasma (5,6). Además, durante la atenuación de la respuesta al choque térmico, HSF1 se reprime mediante la unión directa de Hsp70, HSP40/Hdj-1 y la proteína de unión a HSF 1 (HSBP1) (7). Nombres alternativos Proteína 1 del factor de choque térmico; Factor de transcripción 1 del factor de choque térmico; HSF 1; HSF1; HSTF 1; HSTF1 Especificación REACTIVIDAD: HMR Mk B Dg Pg SENSIBILIDAD: Endógena Peso molecular (kDa): 80 Fuente/Isotipo: IgG de conejo