Anticuerpo monoclonal de conejo CST, 13440L, BRD4 (E2A7X)

Anticuerpo monoclonal para el estudio de la isoforma A de BRD4. Validado para WB, IP, IHC, ChIP, ChIP, C&R, C&T y eCLIP. Disponible en 3 tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo BRD4 (E2A7X) (CST n.° 13440) está listo para su envío. Información de uso del producto Para obtener resultados óptimos de ChIP y ChIP-seq, utilice 10 µl de anticuerpo y 10 µg de cromatina (aproximadamente 4 x 10⁻¹ células) por IP. Este anticuerpo se ha validado con los kits de IP de cromatina enzimática SimpleChIP®. La dilución CUT&RUN se determinó con el kit de ensayo CUT&RUN n.° 86652. La dilución CUT&Tag se determinó con el kit de ensayo CUT&Tag n.° 77552. Western Blot: 1:1000 Inmunoprecipitación: 1:50 Inmunohistoquímica (parafina): 1:20000 - 1:80000 IP de cromatina: 1:50 IP-seq de cromatina: 1:50 CORTE Y CORRE: 1:50 CORTE Y ETIQUETA: 1:50 Clip electrónico: 1:200 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Para obtener una versión sin transportador (BSA ni azida) de este producto, consulte el producto n.° 35632. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunoprecipitación, Inmunohistoquímica (Parafina), IP de cromatina, IP de cromatina-seq, CUT&RUN, CUT&Tag Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo monoclonal de conejo BRD4 (E2A7X) reconoce los niveles endógenos de la proteína BRD4 total. Este anticuerpo reconoce específicamente la isoforma larga de BRD4 (UniProt #O60885-1) y no reconoce otras isoformas de BRD4. Reactividad de las especies: Humana Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un péptido sintético correspondiente a los residuos que rodean Leu1129 de la proteína BRD4 humana. Fondo La proteína 4 que contiene bromodominios (BRD4) es miembro de la familia de proteínas de bromodominios y extra terminales (BET), que también incluye BRD2, BRD3 y BRDT (1-3). Las proteínas de la familia BET contienen dos bromodominios en tándem y un dominio extra terminal (ET), y se unen a residuos de acetil lisina (3). BRD4 es una proteína de unión a la cromatina con preferencia por Lys14 en la histona H3, así como Lys5 y Lys12 en la histona H4 (4). La unión de BRD4 a la cromatina ocurre durante todo el ciclo celular, incluidos los cromosomas mitóticos condensados, cuando la mayoría de los genes están silenciados (5). Se cree que la asociación de BRD4 con la cromatina durante la mitosis es una parte importante del mecanismo de marcadores para acelerar la reactivación de los genes silenciados al salir de la mitosis (2,6). Se ha demostrado que BRD4 facilita la transcripción al reclutar el complejo del factor de elongación de transcripción positiva b (pTEFb) que fosforila Ser2 de la repetición heptapeptídica del dominio carboxiterminal de la ARN polimerasa II, promoviendo la elongación de la transcripción (3,7,8). Además, se ha descubierto que BRD4 forma parte del complejo de superelongación y del complejo del factor asociado a la polimerasa (PAFc) en líneas celulares de leucemia derivadas de la fusión MLL, lo que demuestra un papel para BRD4 en la regulación de la elongación de la transcripción (9). Estudios de investigación han demostrado que BRD4 (y las proteínas de la familia BET) pueden ser dianas terapéuticas prometedoras para varios cánceres impulsados ​​por Myc, como el linfoma de Burkitt y ciertas leucemias mieloides agudas (1,10,11). Los investigadores han descubierto que la inhibición molecular de las proteínas BET es eficaz para inducir la apoptosis en varias líneas celulares leucémicas impulsadas por la fusión de MLL al competir BRD3 y BRD4 de la cromatina, lo que lleva a una expresión reducida de Bcl-2, Myc y CDK6 (9). También se ha demostrado que la inhibición de BET tiene actividades antitumorales contra la proteína nuclear en líneas celulares de carcinoma de línea media de testículo (NUT) y xenoinjertos en ratones donde se encuentra que BRD4 es un socio de translocación frecuente de la proteína NUT (12). Además, BRD4 regula la expresión de algunos genes inflamatorios, y la inhibición de la unión a la cromatina de BRD4 (y proteínas de la familia BET) causa una expresión reducida de un subconjunto de genes inflamatorios en macrófagos, lo que lleva a la protección contra el choque endotóxico y la sepsis (13). Nombres alternativos BRD4; bromodominio 4; proteína 4 que contiene bromodominio; CAP; proteína asociada a cromosomas; HUNK1; HUNKI; MCAP; proteína asociada a cromosomas mitóticos; proteína HUNK1 Especificación REACTIVIDAD: H SENSIBILIDAD: Endógena Peso molecular (kDa): 200 Fuente/Isotipo: IgG de conejo