Anticuerpo monoclonal de conejo CST, 20696S, BRD4 isoforma C (E1Q9N)

Anticuerpo monoclonal para el estudio de la isoforma C de BRD4. Validado para WB, IP, IF y ChIP. Disponible en dos tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo para BRD4 isoforma C (E1Q9N) (CST n.° 20696) está listo para su envío. Información de uso del producto Para obtener resultados óptimos de ChIP, utilice 5 µL de anticuerpo y 10 µg de cromatina (aproximadamente 4 × 10⁻¹ células) por IP. Este anticuerpo se ha validado con los kits de IP de cromatina enzimática SimpleChIP®. Western Blot: 1:1000 Inmunoprecipitación: 1:50 Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica): 1:100 - 1:400 IP de la cromatina: 1:100 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Para obtener una versión sin portador (BSA ni azida) de este producto, consulte el producto n.° 37689. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunoprecipitación, Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica), IP de cromatina Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo monoclonal de conejo isoforma C de BRD4 (E1Q9N) reconoce los niveles endógenos de la proteína BRD4 total. Este anticuerpo no presenta reacción cruzada con otras isoformas de BRD4. Reactividad de las especies: humano, ratón, rata, mono Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un péptido sintético correspondiente a los residuos que rodean Glu715 de la proteína isoforma C del BRD4 humano. Fondo La proteína 4 que contiene bromodominios (BRD4) es miembro de la familia de proteínas de bromodominios y extra terminales (BET), que también incluye BRD2, BRD3 y BRDT (1-3). Las proteínas de la familia BET contienen dos bromodominios en tándem y un dominio extra terminal (ET), y se unen a residuos de acetil lisina (3). BRD4 es una proteína de unión a la cromatina con preferencia por Lys14 en la histona H3, así como Lys5 y Lys12 en la histona H4 (4). La unión de BRD4 a la cromatina ocurre durante todo el ciclo celular, incluidos los cromosomas mitóticos condensados, cuando la mayoría de los genes están silenciados (5). Se cree que la asociación de BRD4 con la cromatina durante la mitosis es una parte importante del mecanismo de marcadores para acelerar la reactivación de los genes silenciados al salir de la mitosis (2,6). Se ha demostrado que BRD4 facilita la transcripción al reclutar el complejo del factor de elongación de transcripción positiva b (pTEFb) que fosforila Ser2 de la repetición heptapeptídica del dominio carboxiterminal de la ARN polimerasa II, promoviendo la elongación de la transcripción (3,7,8). Además, se ha descubierto que BRD4 forma parte del complejo de superelongación y del complejo del factor asociado a la polimerasa (PAFc) en líneas celulares de leucemia derivadas de la fusión MLL, lo que demuestra un papel para BRD4 en la regulación de la elongación de la transcripción (9). Estudios de investigación han demostrado que BRD4 (y las proteínas de la familia BET) pueden ser dianas terapéuticas prometedoras para varios cánceres impulsados ​​por Myc, como el linfoma de Burkitt y ciertas leucemias mieloides agudas (1,10,11). Los investigadores han descubierto que la inhibición molecular de las proteínas BET es eficaz para inducir la apoptosis en varias líneas celulares leucémicas impulsadas por la fusión de MLL al competir BRD3 y BRD4 de la cromatina, lo que conduce a una expresión reducida de Bcl-2, Myc y CDK6 (9). También se ha demostrado que la inhibición de BET tiene actividades antitumorales contra la proteína nuclear en líneas celulares de carcinoma de línea media de testículo (NUT) y xenoinjertos en ratones donde se encuentra que BRD4 es un compañero de translocación frecuente de la proteína NUT (12). Además, BRD4 regula la expresión de algunos genes inflamatorios, y la inhibición de la unión a la cromatina de BRD4 (y proteínas de la familia BET) causa una expresión reducida de un subconjunto de genes inflamatorios en macrófagos, lo que conduce a la protección contra el choque endotóxico y la sepsis (13). La expresión de la isoforma C de BRD4, también conocida como isoforma corta (BRD4-S), es similar a la isoforma larga (BRD4-L). Se ha demostrado que el equilibrio de expresión entre las dos isoformas contribuye a la aparición de enfermedades, donde BRD4-S ha demostrado ser oncogénica en algunos contextos (14-16). BRD4-S es la isoforma predominante que se une a las histonas modificadas y presenta una mayor afinidad que BRD4-L (17,18). BRD4-S también interviene en el daño del ADN, donde recluta el complejo condensina II para controlar la reparación (19). Nombres alternativos BRD4; BRD4 iso2; BRD4 isoforma C; Brd4S; bromodominio que contiene 4; que contiene bromodominio 4; Proteína 4 que contiene bromodominio; TAPA; proteína asociada a cromosomas; HUNK1; HUNKI; MCAP; proteína asociada a cromosomas mitóticos; Proteína HUNK1 Especificación REACTIVIDAD: HMR Mk SENSIBILIDAD: Endógena Peso molecular (kDa): 105 Fuente/Isotipo: IgG de conejo