CST, 25081S, Kit PTMScan® con motivo de fosforilación/transferasa [pS/T]

PTMScan para estudiar en el área de investigación. Información de uso del producto Las células se lisan en un tampón con urea, las proteínas celulares se digieren con proteasas y los péptidos resultantes se purifican mediante extracción en fase sólida en fase reversa. A continuación, los péptidos se someten a purificación por inmunoafinidad utilizando un anticuerpo PTMScan® Motif conjugado con perlas de agarosa de proteína A. Los péptidos no unidos se eliminan mediante lavado y los péptidos capturados con PTM se eluyen con ácido diluido. La purificación en fase reversa se realiza en micropuntas para desalinizar y separar los péptidos del anticuerpo antes de concentrar los péptidos enriquecidos para su análisis por LC-MS/MS. CST recomienda el uso del tampón PTMScan® IAP n.° 9993, incluido en el kit. Almacenamiento Las perlas de anticuerpo se suministran en tampón IAP con 50 % de glicerol. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: PTMScan Fondo Como parte integral de la maquinaria de la función celular, las proteínas se regulan mediante diversas modificaciones postraduccionales. Una de las PTM más prevalentes y ampliamente estudiadas es la fosforilación de serina/treonina. Unas pocas quinasas prominentes, dirigidas a un puñado de motivos de consenso de sustrato, representan la mayoría de las decenas de miles de sitios conocidos y previstos en más de 13 000 proteínas humanas (1-3). Cell Signaling Technology ha desarrollado anticuerpos con motivos fosfo-Ser/Thr para el perfilado proteómico de sustratos de quinasas. Estos incluyen, entre otros, sustratos de Akt, AMPK, MAPK, CDK, PKA, PKC y CKII. Nombres alternativos Pan-Fosfo