CST, 2600S, anticuerpo fosfo-HP1 gamma (Ser83)

Anticuerpo policlonal para el estudio del fosfato HP1-gamma (Ser93). Validado para Western Blot, inmunoprecipitación e inmunofluorescencia (inmunocitoquímica). Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo Fosfo-HP1-gamma (Ser83) (CST n.° 2600) está listo para su envío. Información de uso del producto Western Blot: 1:1000 Inmunoprecipitación: 1:25 Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica): 1:200 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA y 50 % de glicerol. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunoprecipitación, Inmunofluorescencia (Inmunocitoquímica) Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo fosfo-HP1 gamma (Ser83) detecta los niveles endógenos de la proteína HP1γ solo cuando está fosforilada en Ser83 (también conocida como Ser93 de la forma no procesada de HP1γ). Este anticuerpo no presenta reacción cruzada con las proteínas HP1α ni HP1β. Reactividad de las especies: humano, ratón, rata, mono Fuente / Purificación Los anticuerpos policlonales se producen inmunizando animales con un fosfopéptido sintético correspondiente a los aminoácidos que rodean la Ser83 de la HP1γ humana. Los anticuerpos se purifican mediante cromatografía de afinidad. Fondo La proteína de heterocromatina 1 (HP1) es una familia de moléculas adaptadoras heterocromáticas implicadas tanto en el silenciamiento génico como en la estructura de la cromatina de orden superior (1). Los tres miembros de la familia HP1 (α, β e γ) se asocian principalmente con la heterocromatina centromérica; sin embargo, HP1β e γ también se localizan en sitios eucromáticos del genoma (2,3). Las proteínas HP1 tienen un peso aproximado de 25 kDa y contienen un cromodominio amino-terminal conservado, seguido de una región bisagra variable y un dominio cromosombra carboxi-terminal conservado. El cromodominio facilita la unión a la histona H3 trimetilada en Lys9, una "marca" de histona estrechamente asociada con la heterocromatina centromérica (4,5). La región bisagra variable une tanto al ARN como al ADN de forma independiente de la secuencia (6). El dominio chromoshadow media la dimerización de las proteínas HP1, además de unirse a múltiples proteínas implicadas en el silenciamiento génico y la formación de heterocromatina, incluyendo la histona metiltransferasa SUV39H, las ADN metiltransferasas DNMT1 y DNMT3a, y la subunidad p150 del factor de ensamblaje de cromatina 1 (CAF-1) (7-9). Además de contribuir a la formación y propagación de la heterocromatina, HP1 y SUV39H1 también se encuentran en complejo con las proteínas retinoblastoma (Rb) y E2F6, las cuales funcionan para reprimir la transcripción génica eucromática en células quiescentes (10,11). Las proteínas HP1 están sujetas a múltiples modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación, acetilación, metilación, ubiquitinación y sumoilación, lo que sugiere varios medios de regulación (12-14). HP1γ es fosforilada en Ser83 por la proteína quinasa A (PKA), y la activación de PKA por el tratamiento con forskolina e IBMX conduce a una mayor fosforilación (14). La fosforilación de HP1γ en Ser83 también aumenta durante la mitosis como lo demuestra el anticuerpo fosfo-HP1γ (Ser83), que muestra una mayor tinción inmunofluorescente en células mitóticas no tratadas y una mayor señal de transferencia Western en lisados ​​de células detenidas en mitosis por tratamiento con paclitaxel. La fosforilación de Ser83 solo ocurre en una subpoblación de HP1γ que se encuentra asociada con la eucromatina, específicamente HP1γ unida a regiones codificantes de genes activos (14). Esta fosforilación altera la capacidad de HP1γ para silenciar la transcripción y puede ser un marcador para la elongación de la transcripción (14). Nombres alternativos CBX3; cromobox 3; homólogo de cromobox 3 (homólogo de HP1 gamma, Drosophila); homólogo de proteína cromobox 3; HECH; homólogo gamma de proteína 1 de heterocromatina; proteína heterocromatina HP1 gamma; proteína similar a la heterocromatina 1; HP1 gamma; homólogo de HP1 gamma; HP1-GAMMA; HP1Hs-gamma; proteína modificadora 2 Especificación REACTIVIDAD: HMR Mk SENSIBILIDAD: Endógena Peso molecular (kDa): 22 FUENTE: Conejo