CST, 2696S, anticuerpo fosfo-B-Raf (Ser445)

Anticuerpo policlonal para el estudio del fosfato de B-Raf (Ser446). Validado para Western Blot. Disponible en dos tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo Fosfo-B-Raf (Ser445) (CST n.° 2696) está listo para su envío. Información de uso del producto Western Blot: 1:1000 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA y 50 % de glicerol. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo Phospho-B-Raf (Ser445) detecta niveles endógenos de B-Raf cuando se fosforila en la serina 445. El residuo Ser446 de B-Raf humano históricamente se ha denominado Ser445 y es homólogo del Ser431 de ratón. Reactividad de las especies: humano, ratón, rata, mono Fuente / Purificación Los anticuerpos policlonales se producen inmunizando animales con un péptido sintético fosforado correspondiente a los residuos que rodean la serina 445 del B-Raf humano. Los anticuerpos se purifican mediante cromatografía de afinidad de proteína A y péptidos. Fondo A-Raf, B-Raf y c-Raf (Raf-1) son los principales efectores reclutados por Ras unido a GTP para activar la vía de la quinasa MEK-MAP (1). La activación de c-Raf es la mejor comprendida e implica la fosforilación en múltiples sitios de activación, incluyendo Ser338, Tyr341, Thr491, Ser494, Ser497 y Ser499 (2). Se ha demostrado que la quinasa activada por p21 (PAK) fosforila c-Raf en Ser338, y la familia Src fosforila Tyr341 para inducir la actividad de c-Raf (3,4). Ser338 de c-Raf corresponde a sitios similares en A-Raf (Ser299) y B-Raf (Ser446), aunque este sitio está constitutivamente fosforilado en B-Raf (5). Los sitios de unión inhibitorios 14-3-3 en c-Raf (Ser259 y Ser621) pueden ser fosforilados por Akt y AMPK, respectivamente (6,7). Si bien A-Raf, B-Raf y c-Raf son similares en secuencia y función, se ha observado una regulación diferencial (8). De particular interés, B-Raf contiene tres sitios de fosforilación de Akt de consenso (Ser365, Ser429 y Thr440) y carece de un sitio equivalente a Tyr341 de c-Raf (8,9). Estudios de investigación han demostrado que la mutación V600E de B-Raf resulta en una actividad quinasa elevada y se encuentra comúnmente en el melanoma maligno (10). Seis residuos de c-Raf (Ser29, Ser43, Ser289, Ser296, Ser301 y Ser642) se hiperfosforilan de una manera consistente con la inactivación de c-Raf. La hiperfosforilación de estos seis sitios depende de la señalización MEK corriente abajo y hace que c-Raf no responda a los eventos de activación posteriores (11). Nombres alternativos Proteína B-raf de 94 kDa; B-raf; protooncogén B-Raf, serina/treonina-proteína quinasa (p94); protooncogén B-Raf, serina/treonina quinasa; serina/treonina-proteína B-Raf; B-RAF1; BRAF; BRAF1; FLJ95109; MGC126806; MGC138284; homólogo B1 del oncogén viral del sarcoma murino (v-raf); NS7; p94; protooncogén B-Raf; RAFB1; serina/treonina-proteína quinasa B-raf; homólogo B del oncogén viral del sarcoma murino v-raf; homólogo B1 del oncogén viral del sarcoma murino v-Raf Especificación REACTIVIDAD: HMR Mk SENSIBILIDAD: Endógena Peso molecular (kDa): 86 FUENTE: Conejo