Product Description
Anticuerpo policlonal para el estudio de NEDD8. Validado para Western Blot, inmunoprecipitación e inmunohistoquímica (parafina). Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo NEDD8 (CST n.° 2745) está listo para su envío.
Información de uso del producto
Western Blot: 1:1000
Inmunoprecipitación: 1:25
Inmunohistoquímica (parafina): 1:200
Almacenamiento
Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA y 50 % de glicerol. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo.
Protocolo
Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunoprecipitación, Inmunohistoquímica (Parafina)
Especificidad / Sensibilidad
El anticuerpo NEDD8 detecta niveles endógenos de la proteína NEDD8, tanto libre como conjugada. Este anticuerpo no presenta reacción cruzada con otros miembros de la familia de las ubiquitinas, como ubiquitina, SUMO1, SUMO2, SUMO3 e ISG15.
Reactividad de las especies: humano, ratón, rata, mono
Fuente / Purificación
Los anticuerpos policlonales se producen inmunizando animales con un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos del extremo amino de la proteína NEDD8 humana. Los anticuerpos se purifican mediante cromatografía de afinidad con proteína A y péptidos.
Fondo
La proteína 8 expresada en células precursoras neuronales y regulada negativamente en el desarrollo (NEDD8), también conocida como Rub1 (relacionada con la ubiquitina 1) en plantas y levaduras, pertenece a la familia de proteínas similares a la ubiquitina (1,2). La unión covalente de NEDD8 a proteínas diana, denominada neddilación, es un proceso reversible de varios pasos análogo a la ubiquitinación. NEDD8 se sintetiza primero en forma precursora con un péptido de extensión carboxiterminal que es eliminado por la proteína hidrolasa UCH-L3 o NEDP1/DEN1 para producir una proteína NEDD8 madura (3,4). Posteriormente, NEDD8 madura se une covalentemente a las proteínas diana a través del residuo de glicina carboxiterminal en una reacción catalizada por el complejo heterodímero APP-BP1/Uba3 y Ubc12 como enzimas similares a E1 y E2, respectivamente (5). Una proteína ligasa E3, Roc1/Rbx1, también es necesaria para la neddilación de las proteínas cullinas (6). La desneddilación de proteínas es catalizada por diversas enzimas celulares, entre ellas la proteasa USP21 "específica de ubiquitina", la hidrolasa NEDP1/DEN1 y el COP9/signalosoma (CSN) (7,8,9). A diferencia de la vía de la ubiquitina, el sistema de modificación NEDD8 actúa solo sobre unos pocos sustratos y no parece dirigirse a las proteínas para su degradación. La neddilación de las proteínas cullinas activa el complejo SCF (Skp1-Cullin-F-box) de la ubiquitina ligasa E3, promoviendo la formación del complejo y potenciando el reclutamiento del intermediario E2-ubiquitina (10). Si bien la modificación de VHL por NEDD8 no es necesaria para la ubiquitinación de HIF1-α, sí lo es para el ensamblaje de la matriz de fibronectina (11). La neddilación de p53 dependiente de Mdm2 inhibe su actividad transcripcional (12).
Nombres alternativos
FLJ43224; MGC104393; MGC125896; MGC125897; NEDD-8; NEDD8; Modificador similar a la ubiquitina NEDD8; Neddylin; Proteína 8 expresada en células precursoras neurales y regulada a la baja durante el desarrollo; Proteína similar a la ubiquitina Nedd8 expresada en células precursoras neurales y regulada a la baja durante el desarrollo
Especificación
REACTIVIDAD: HMR Mk
SENSIBILIDAD: Endógena
Peso molecular (kDa): 9
FUENTE: Conejo
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Collaboration
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