CST, 27683T, anticuerpo monoclonal de conejo acetil-histona H3 (Lys36) (D9T5Q)

Anticuerpo monoclonal para el estudio del acetilato de H3 (Lys36). Validado para WB, IP, IF, F, ChIP. Disponible en dos tamaños. Acetil-histona H3 (Lys36) (D9T5Q), altamente específico y rigurosamente validado internamente. El anticuerpo monoclonal de conejo (CST n.° 27683) está listo para enviarse. Información de uso del producto Para obtener resultados óptimos de ChIP y ChIP-seq, utilice 10 µl de anticuerpo y 10 µg de cromatina (aproximadamente 4 x 10⁻¹ células) por IP. Este anticuerpo se ha validado con los kits de IP de cromatina enzimática SimpleChIP®. Western Blot: 1:1000 Inmunoprecipitación: 1:200 Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica): 1:3200 Citometría de flujo (fijada/permeabilizada): 1:400 IP de cromatina: 1:50 IP-seq de cromatina: 1:50 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunoprecipitación, Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica), Citometría de flujo (fijada/permeabilizada), IP de cromatina, IP de cromatina-seq Especificidad / Sensibilidad Acetil-histona H3 (Lys36) (D9T5Q) Reactividad de las especies: humano, ratón, rata, mono Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un péptido sintético correspondiente a los residuos que rodean la Lys36 acetilada de la proteína histona H3 humana. Fondo El nucleosoma, compuesto por cuatro proteínas histonas centrales (H2A, H2B, H3 y H4), es el componente principal de la cromatina. Originalmente se creía que funcionaba como un andamiaje estático para el empaquetamiento del ADN, pero ahora se ha demostrado que las histonas son proteínas dinámicas que experimentan múltiples tipos de modificaciones postraduccionales, como la acetilación, la fosforilación, la metilación y la ubiquitinación (1,2). La acetilación de histonas se produce principalmente en los dominios de la cola amino-terminal de las histonas H2A (Lys5), H2B (Lys5, 12, 15 y 20), H3 (Lys9, 14, 18, 23, 27, 36 y 56) y H4 (Lys5, 8, 12 y 16), y es importante para la regulación de la deposición de histonas, la activación transcripcional, la replicación, la recombinación y la reparación del ADN (1-3). La hiperacetilación de las colas de histonas neutraliza la carga positiva de estos dominios y se cree que debilita las interacciones histona-ADN y nucleosoma-nucleosoma, desestabilizando así la estructura de la cromatina y aumentando la accesibilidad del ADN a varias proteínas de unión al ADN (4,5). Además, la acetilación de residuos específicos de lisina crea sitios de acoplamiento para un módulo proteico llamado bromodominio, que se une a los residuos de lisina acetilados (6). Muchas proteínas reguladoras de la transcripción y la cromatina contienen bromodominios y pueden ser reclutadas a promotores génicos, en parte, a través de la unión de colas de histonas acetiladas. La acetilación de histonas está mediada por las acetiltransferasas de histonas (HAT), como CBP/p300, GCN5L2, PCAF y Tip60, que son reclutadas a los genes por factores proteicos unidos al ADN para facilitar la activación transcripcional (3). La desacetilación, mediada por las histonas desacetilasas (proteínas HDAC y sirtuinas), revierte los efectos de la acetilación y generalmente facilita la represión transcripcional (7,8). La acetilación de la histona H3 Lys36 está mediada por la histona acetiltransferasa GCN5 y se conserva en múltiples especies, desde levaduras hasta mamíferos (9). La acetilhistona H3 Lys36 se localiza predominantemente en los promotores de genes transcritos por la ARN polimerasa II activa y se superpone con otras marcas de acetilación asociadas con la activación transcripcional, como la acetilhistona H3 Lys9 y la Lys14 (9). El patrón de la acetilhistona H3 Lys36 está inversamente relacionado con el de la trimetilhistona H3 Lys36, que se encuentra en el cuerpo génico de los genes transcritos activamente. Nombres alternativos H3; Histona agrupada H3 1; Familia de histonas H3, miembro A; H3/A; H31; H3C1; H3C10; H3C11; H3C12; H3C2; H3C3; H3C4; H3C6; H3C7; H3C8; H3FA; H3FB; H3FC; H3FC HIST1H3C; H3FD; H3FF; H3FH; H3FI; H3FJ; H3FK; H3FL; HIST1H3A; HIST1H3B; HIST1H3C; HIST1H3D; HIST1H3E; HIST1H3F; HIST1H3G; HIST1H3H; HIST1H3I; HIST1H3J; histona 1, H3a; grupo de histonas 1 Miembro de la familia H3 a; grupo de histonas 1, H3a; Histona H3; Histona H3.1; Histona H3/a; Histona H3/b; Histona H3/c; Histona H3/d; Histona H3/f; Histona H3/h; Histona H3/i; Histona H3/j; Histona H3/k; Histona H3/l Especificación REACTIVIDAD: HMR Mk SENSIBILIDAD: Endógena Peso molecular (kDa): 17 Fuente/Isotipo: IgG de conejo