CST, 28303S, Kit PTMScan® con motivo de fosforilación/transferasa [p(S/T)P]

PTMScan para estudiar en el área de investigación. Información de uso del producto Las células se lisan en un tampón con urea, las proteínas celulares se digieren con proteasas y los péptidos resultantes se purifican mediante extracción en fase sólida en fase reversa. A continuación, los péptidos se someten a purificación por inmunoafinidad utilizando un anticuerpo PTMScan® Motif conjugado con perlas de agarosa de proteína A. Los péptidos no unidos se eliminan mediante lavado y los péptidos capturados con PTM se eluyen con ácido diluido. La purificación en fase reversa se realiza en micropuntas para desalinizar y separar los péptidos del anticuerpo antes de concentrar los péptidos enriquecidos para su análisis por LC-MS/MS. CST recomienda el uso del tampón PTMScan® IAP n.° 9993, incluido en el kit. Almacenamiento Las perlas de anticuerpo se suministran en tampón IAP con 50 % de glicerol. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: PTMScan Fondo La superfamilia CMGC de proteínas quinasas dirigidas por prolina es un grupo de proteínas altamente conservado y antiguo que fosforila una amplia gama de sustratos involucrados en la respuesta al estrés, el crecimiento y la diferenciación, y el ciclo de división celular. Las secuencias consenso diana de MAPK, SAPK/JNK, CDK, CKII, ERK y GSK incluyen un sitio de fosforilación de serina o treonina seguido de una prolina (1-3). Cell Signaling Technology ha desarrollado anticuerpos que se unen específicamente a los motivos fosfo-(S/T)P para permitir el estudio de una gran proporción del fosfoproteoma e identificar nuevos sustratos de las quinasas CMGC. Nombres alternativos Rico en prolina; rico en prolina