Anticuerpo monoclonal de conejo CST, 28692S, 5-metilcitosina (5-mC) (D3S2Z)

Anticuerpo monoclonal para estudio. Validado para inmunofluorescencia (inmunocitoquímica) y transferencia puntual de ADN. Disponible en dos tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo 5-metilcitosina (5-mC) (D3S2Z) (CST n.° 28692) está listo para envío. Información de uso del producto Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica): 1:1600 Dot Blot de ADN: 1:1000 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica), DNA Dot Blot Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo monoclonal de conejo 5-metilcitosina (5-mC) (D3S2Z) reconoce los niveles endógenos de 5-metilcitosina. Este anticuerpo se ha validado mediante ensayos ELISA, dot blot y MeDIP y muestra una alta especificidad para la 5-metilcitosina. Reactividad de las especies: Se espera que se presenten todas las especies Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con 5-metilcitidina. Fondo La metilación del ADN en los residuos de citosina es una modificación epigenética hereditaria crucial para la correcta regulación de la expresión génica, la impronta genómica y el desarrollo de los mamíferos (1,2). La 5-metilcitosina es una marca epigenética represiva establecida por dos enzimas, DNMT3a y DNMT3b, y es mantenida por DNMT1 (3, 4). Originalmente, se creía que la 5-metilcitosina se agotaba pasivamente durante la replicación del ADN. Sin embargo, estudios posteriores han demostrado que las proteínas de translocación diez-once (TET), TET1, TET2 y TET3, pueden catalizar la oxidación de la citosina metilada a 5-hidroximetilcitosina (5-hmC) (5). Además, las proteínas TET pueden oxidar aún más la 5-hmC para formar 5-formilcitosina (5-fC) y 5-carboxilcitosina (5-caC), ambas escindidas por la timina-ADN glicosilasa (TDG), vinculando eficazmente la oxidación de la citosina a la vía de reparación por escisión de bases y apoyando la desmetilación activa de la citosina (6,7). Normalmente, la metilación del ADN ocurre de manera bimodal, de modo que los dinucleótidos CpG se metilan en gran medida en todo el genoma, excepto en tramos cortos de secuencias ricas en CpG asociadas con promotores de genes, conocidos como islas CpG, donde la metilación está prácticamente ausente (8). Los genomas de células cancerosas a menudo experimentan hipometilación global, mientras que las islas CpG se hipermetilan, lo que provoca la represión de sus promotores asociados (9). Hay evidencia de que una serie de islas CpG hipermetiladas aberrantemente encontradas en carcinomas se encuentran en genes supresores de tumores como RB1, MLH1 y BRCA1 (10). Especificación REACTIVIDAD: Todas SENSIBILIDAD: Endógena Fuente/Isotipo: IgG de conejo