CST, 31329W2, fosfohistona H2A.X (Ser139) (20E3) Anticuerpo monoclonal de conejo (conjugado SignalFlex™ Alexa Fluor® 350)

Anticuerpo monoclonal para el estudio del fosfato H2AX (Ser139). Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo para la fosfohistona H2A.X (Ser139) (20E3) (conjugado SignalFlex ^™ Alexa Fluor® ³⁵⁰ ) (CST n.° 31329) está listo para su envío. Información de uso del producto Los conjugados SignalFlex™ se producen utilizando anticuerpos primarios de Cell Signaling Technology® altamente validados y métodos de conjugación rigurosamente probados, lo que garantiza conjugados de alta calidad y consistencia entre lotes. Estos conjugados se someten a pruebas de control de calidad mediante cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) para determinar la integridad de los anticuerpos. Sin embargo, no se prueban en ensayos específicos. El usuario final debe determinar las diluciones/concentraciones óptimas. Al realizar citometría de flujo, recomendamos utilizar un conjugado de control de isotipo a la misma concentración que el conjugado de anticuerpo. Almacenamiento Se suministra en PBS (pH 7,2), menos del 0,1 % de azida sódica y 2 mg/ml de BSA. Conservar a 4 °C. No alicuotar el anticuerpo. Proteger de la luz. No congelar. Especificidad / Sensibilidad Fosfohistona H2A.X (Ser139) (20E3) mAb de conejo (SignalFlex™ Alexa Fluor Reactividad de las especies: humano, ratón, rata, mono Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un fosfopéptido sintético correspondiente a los residuos que rodean a Ser139 del H2A.X. humano. Fondo La histona H2A.X es una histona variante que representa aproximadamente el 10% del total de proteínas histonas H2A en fibroblastos humanos normales (1). H2A.X es necesaria para la detención del ciclo celular mediada por puntos de control y la reparación del ADN tras roturas de ADN bicatenario (1). El daño al ADN, causado por radiación ionizante, luz UV o agentes radiomiméticos, resulta en una rápida fosforilación de H2A.X en Ser139 por quinasas similares a PI3K, incluyendo ATM, ATR y DNA-PK (2,3). A los pocos minutos del daño al ADN, H2A.X se fosforila en Ser139 en los sitios de daño del ADN para generar γ-H2A.X (4). Este evento muy temprano en la respuesta al daño del ADN es necesario para el reclutamiento de una multitud de proteínas de respuesta al daño del ADN, incluyendo MDC1, NBS1, RAD50, MRE11, 53BP1 y BRCA1 (1). Además de su función en la reparación del daño del ADN, H2A.X es necesario para la fragmentación del ADN durante la apoptosis y es fosforilada por varias quinasas en respuesta a señales apoptóticas. H2A.X es fosforilada en Ser139 por DNA-PK en respuesta a la activación del receptor de muerte celular, c-Jun N-terminal Kinase (JNK1) en respuesta a la radiación UV-A y p38 MAPK en respuesta a la privación de suero (5-8). H2A.X es constitutivamente fosforilada en Tyr142 en células no dañadas por WSTF (factor de transcripción del síndrome de Williams-Beuren) (9,10). Tras el daño del ADN, y simultáneamente con la fosforilación de Ser139, Tyr142 es desfosforilada en los sitios de daño del ADN por las fosfatasas EYA1 y EYA3 reclutadas (9). Mientras que la fosforilación en Ser139 facilita el reclutamiento de proteínas reparadoras del ADN y proteínas apoptóticas a sitios de daño del ADN, la fosforilación en Tyr142 parece determinar qué conjunto de proteínas se reclutan. La fosforilación de H2A.X en Tyr142 inhibe el reclutamiento de proteínas reparadoras del ADN y promueve la unión de factores proapoptóticos como JNK1 (9). Los fibroblastos embrionarios de ratón que expresan solo el mutante H2A.X Y142F, que favorece el reclutamiento de proteínas reparadoras del ADN sobre las proteínas apoptóticas, muestran una respuesta apoptótica reducida a la radiación ionizante (9). Por lo tanto, parece que el equilibrio de la fosforilación y desfosforilación de H2A.X Tyr142 proporciona un mecanismo de conmutación para determinar el destino celular después del daño del ADN. Nombres alternativos Miembro X de la familia de histonas H2A; Miembro X de la familia de histonas H2A; H2A.X; Histona variante H2A.X; H2a/x; H2AFX; H2AX; Histona H2AX; Histona H2A.x; Histona H2AX Especificación REACTIVIDAD: HMR Mk SENSIBILIDAD: Endógena Fuente/Isotipo: IgG de conejo