CST, 32183T, anticuerpo monoclonal de conejo contra el receptor de fosfoglucocorticoides (Ser211) (F7L7X)

Anticuerpo monoclonal para el estudio del fosfato del receptor de glucocorticoides (Ser211). Validado para WB, IP, F, ChIP y ChIP. Disponible en dos tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo contra el receptor de fosfoglucocorticoides (Ser211) (F7L7X) (CST n.° 32183) está listo para su envío. Información de uso del producto Para obtener resultados óptimos de ChIP, utilice 10 μL de anticuerpo y 10 μg de cromatina (aproximadamente 4 × 10⁻¹ células) por IP. Este anticuerpo se ha validado con los kits de IP de cromatina enzimática SimpleChIP®. Western Blot: 1:1000 Inmunoprecipitación: 1:100 Citometría de flujo (fijada/permeabilizada): 1:400 - 1:1600 IP de la cromatina: 1:100 IP-seq de cromatina: 1:100 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/mL de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunoprecipitación, Citometría de flujo (fijada/permeabilizada), IP de cromatina, IP de cromatina-seq Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo monoclonal de conejo para el receptor de fosfoglucocorticoides (Ser211) (F7L7X) reconoce los niveles endógenos de la proteína del receptor de glucocorticoides solo cuando se fosforila en Ser211. Este anticuerpo detecta una proteína de 250 kDa de identidad desconocida en algunas líneas celulares. Reactividad de las especies: humano, ratón, rata Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un fosfopéptido sintético correspondiente a los residuos que rodean a Ser211 de la proteína del receptor de glucocorticoides humano. Fondo Las hormonas glucocorticoides controlan la proliferación celular, la inflamación y el metabolismo mediante su asociación con el receptor de glucocorticoides (GR)/NR3C1, un miembro de la superfamilia de factores de transcripción de receptores hormonales nucleares (1). El GR se compone de varios elementos estructurales conservados, incluyendo un dominio de unión al ligando carboxiterminal (que también contiene residuos críticos para la dimerización del receptor y la transactivación génica dependiente de hormonas), una región bisagra vecina que contiene señales de localización nuclear, un dominio central de unión al ADN que contiene dedos de zinc y una región variable aminoterminal que participa en la transcripción génica independiente del ligando. En ausencia de hormona, una población significativa de GR se localiza en el citoplasma en una forma inactiva a través de su asociación con proteínas chaperonas reguladoras, como HSP90, HSP70 y FKBP52. Al unirse a la hormona, GR se libera del complejo de chaperona y se transloca al núcleo como un dímero para asociarse con secuencias de ADN específicas denominadas elementos de respuesta a glucocorticoides (GRE), mejorando o reprimiendo así la transcripción de genes diana específicos (2). Se demostró que la activación transcripcional mediada por GR está modulada por la fosforilación (3-5). Aunque GR puede fosforilarse basalmente en ausencia de hormona, se hiperfosforila al unirse a agonistas del receptor. Se ha sugerido que la fosforilación dependiente de hormonas de GR puede determinar la especificidad del promotor diana, la interacción de cofactores, la fuerza y ​​duración de la señalización del receptor, la estabilidad del receptor y la localización subcelular del receptor (3). De hecho, Ser211 de GR humano se fosforila en mayor medida en presencia de hormona, y los estudios de fraccionamiento bioquímico posteriores al tratamiento hormonal indican que GR fosforilado en Ser211 se encuentra en el núcleo (3). Por lo tanto, la fosforilación de Ser211 es un biomarcador para GR activado. Una capa adicional de complejidad para la señalización de GR reside en la capacidad de generar múltiples isoformas a través del empalme alternativo y el uso de sitios de inicio de traducción alternativos, aumentando así el repertorio de homodímeros y heterodímeros de señalización funcional (6,7). Nombres alternativos GCCR; GCR; GCRST; variante 1 del receptor nuclear de glucocorticoides; receptor de glucocorticoides; GR; GRL; NR3C1; miembro 1 del grupo C de la subfamilia 3 del receptor nuclear; variante hGR-B(54) del miembro 1 del grupo C de la subfamilia 3 del receptor nuclear; variante hGR-B(77) del miembro 1 del grupo C de la subfamilia 3 del receptor nuclear; variante hGR-B(93) del miembro 1 del grupo C de la subfamilia 3 del receptor nuclear (receptor de glucocorticoides) Especificación REACTIVIDAD: HMR SENSIBILIDAD: Endógena Peso molecular (kDa): 94, 91 Fuente/Isotipo: IgG de conejo