Anticuerpo monoclonal de conejo CST, 3417T, CTCF (D1A7)

Anticuerpo monoclonal para el estudio de CTCF. Validado para WB, IP, IF, ChIP, ChIP, C&R, C&T. Disponible en dos tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo CTCF (D1A7) (CST n.° 3417) está listo para su envío. Información de uso del producto Para obtener resultados óptimos de ChIP y ChIP-seq, utilice 10 µl de anticuerpo y 10 µg de cromatina (aproximadamente 4 x 10⁻¹ células) por IP. Este anticuerpo se ha validado con los kits de IP de cromatina enzimática SimpleChIP®. La dilución CUT&RUN se determinó con el kit de ensayo CUT&RUN n.° 86652. La dilución CUT&Tag se determinó con el kit de ensayo CUT&Tag n.° 77552. Western Blot: 1:1000 Inmunoprecipitación: 1:50 Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica): 1:50 IP de cromatina: 1:50 IP-seq de cromatina: 1:50 CORTE Y CORRE: 1:50 CORTE Y ETIQUETA: 1:50 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunoprecipitación, Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica), IP de cromatina, IP de cromatina-seq, CUT&RUN, CUT&Tag Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo monoclonal de conejo CTCF (D1A7) detecta niveles endógenos de proteína CTCF total. Este anticuerpo no presenta reacción cruzada con BORIS. Reactividad de las especies: humano, rata, mono Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un péptido sintético correspondiente a la proteína CTCF humana. Fondo El factor de unión a CCCTC (CTCF) y su parálogo, el hermano del regulador de sitios de impronta (BORIS), son factores de transcripción altamente conservados que regulan la activación y represión transcripcional, la función aislante y las regiones de control de impronta (ICR) (1-4). Aunque tienen extremos amino y carboxi terminales divergentes, ambas proteínas contienen 11 dominios de dedos de zinc conservados que trabajan en combinación para unirse a los mismos elementos de ADN (1). CTCF se expresa de forma ubicua y contribuye a la regulación transcripcional de genes regulados por el crecimiento celular, incluidos , , , , , , , y (1). CTCF también se une y es necesario para la actividad de bloqueo del potenciador de todos los elementos aislantes e ICR conocidos, incluidos los locus antisentido H19/IgF2, síndrome de Prader-Willi/Angelman y transcripción específica del cromosoma X inactiva (XIST) (5-7). La unión del CTCF al ADN es sensible a la metilación del ADN, una marca que determina la selección del alelo impreso (materno vs. paterno) (1). Las diversas funciones del CTCF están reguladas por al menos dos modificaciones postraduccionales diferentes. La poli(ADP-ribosilación) del CTCF es necesaria para la función aislante (8). La fosforilación de Ser612 por la proteína quinasa CK2 facilita un cambio del CTCF de un represor transcripcional a un activador en el promotor c-Myc (9). Se han encontrado mutaciones o deleciones en muchos tumores de mama, próstata y Wilms (10,11). La expresión de BORIS está restringida a los espermatocitos y es mutuamente excluyente de CTCF (3). En las células que expresan BORIS, los promotores de antígenos de cáncer de testículo ligados al cromosoma X como MAGE-A1 están desmetilados y activados, pero metilados e inactivos en las células somáticas que expresan CTCF (12). Al igual que otras proteínas específicas de los testículos, BORIS se expresa de forma anormal en diferentes tipos de cáncer, como el cáncer de mama, y ​​tiene una mayor afinidad que CTCF por los sitios de unión al ADN, lo que resta valor a la posible actividad supresora de tumores de CTCF (1,3,13,14). Nombres alternativos Represor transcripcional de 11 dedos de zinc; proteína de 11 dedos de zinc; factor de unión a CCCTC; factor de unión a CCCTC (proteína de dedos de zinc); CFAP108; CTCF; parálogo de CTCFL; FAP108; MRD21; represor transcripcional CTCF Especificación REACTIVIDAD: HR Mk SENSIBILIDAD: Endógena Peso molecular (kDa): 140 Fuente/Isotipo: IgG de conejo