CST, 36104S, Ferronaranja

Colorantes celulares para estudio en el área de investigación. Información de uso del producto Preparación del reactivo: El material se presenta como un sólido/película transparente a blanquecino, difícil de ver en el tubo, que puede consolidarse dentro de la tapa. Para garantizar que el material se haya contenido dentro del vial, centrifugue el tubo de FerroOrange liofilizado una vez que haya alcanzado la temperatura ambiente y antes de la reconstitución. Para crear una solución de FerroOrange de 1 mmol/L, combine 35 µL de DMSO con 24 µg de FerroOrange y pipetee repetidamente para disolver. Para preparar la solución de FerroOrange de 1 µmol/L, diluya el FerroOrange de 1 mmol/L 1:1000 en HBSS. Protéjalo de la luz. IMPORTANTE: Se puede usar DMF o etanol como alternativa al DMSO. Se puede usar un medio sin suero como alternativa al HBSS. No se puede usar un medio con suero, ya que generará un fondo alto. La solución de 1 mmol/L es estable durante 1 mes a -20 °C protegida de la luz. La solución de 1 µmol/L es inestable y debe prepararse y usarse inmediatamente antes de teñir el experimento. NOTA: Si se trabaja con células en suspensión, es necesario sedimentar las células mediante centrifugación suave antes de todos los pasos de lavado y aspiración. Protocolo: 1. Cultivar las células según corresponda y realizar los tratamientos según sea necesario. 2. Aspirar el sobrenadante. 3. Lavar las células tres veces con HBSS o medio sin suero. 4. Agregar la solución de trabajo de FerroOrange de 1 µmol/L a las células e incubar durante 30 min. 5. Examinar las células mediante microscopía de fluorescencia. Consultar la sección Propiedades de fluorescencia para los espectros de excitación y emisión. 6. Para el análisis por citometría de flujo, disociar las células adherentes o recolectar células en suspensión. Analizar en un citómetro de flujo a la densidad celular deseada. Almacenamiento Conservar a 4 °C, desecado y protegido de la luz y de metales. En forma liofilizada, el producto es estable durante 12 meses. Una vez reconstituido a una concentración de 1 mmol/L, conservar a -20 °C, protegido de la luz y de metales, y consumir en un plazo de 1 mes.