Product Description
Anticuerpo monoclonal para el estudio del receptor de glucocorticoides. Validado para WB, IP, IF, F, ChIP y ChIP. Disponible en dos tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo contra el receptor de glucocorticoides (D8H2) (CST n.° 3660) está listo para su envío.
Información de uso del producto
Para obtener resultados óptimos de ChIP y ChIP-Seq, utilice 5 µl de anticuerpo y 10 µg de cromatina (aproximadamente 4 x 10⁻¹ células) por IP. Este anticuerpo se ha validado con los kits de IP de cromatina enzimática SimpleChIP®.
Western Blot: 1:1000
Inmunoprecipitación: 1:100
Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica): 1:1600 - 1:6400
Citometría de flujo (fijada/permeabilizada): 1:3200 - 1:6400
IP de la cromatina: 1:100
IP-seq de cromatina: 1:100
Almacenamiento
Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Para obtener una versión sin transportador (BSA ni azida) de este producto, consulte el producto n.° 86748.
Protocolo
Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunoprecipitación, Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica), Citometría de flujo (fijada/permeabilizada), IP de cromatina, IP de cromatina-seq
Especificidad / Sensibilidad
El anticuerpo monoclonal de conejo contra el receptor de glucocorticoides (D8H2) reconoce los niveles endógenos de la proteína total del receptor de glucocorticoides. Según el alineamiento de secuencias, se prevé que este anticuerpo presente reacción cruzada con todas las isoformas conocidas generadas por el sitio de inicio de la traducción alternativo del receptor de glucocorticoides-α y el receptor de glucocorticoides-β. Este anticuerpo no presenta reacción cruzada con el receptor de mineralocorticoides.
Reactividad de las especies: humano, ratón, rata, mono
Fuente / Purificación
El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un péptido sintético correspondiente a los residuos que rodean a Leu378 de la proteína del receptor de glucocorticoides humano.
Fondo
Las hormonas glucocorticoides controlan la proliferación celular, la inflamación y el metabolismo mediante su asociación con el receptor de glucocorticoides (GR)/NR3C1, un miembro de la superfamilia de factores de transcripción de receptores hormonales nucleares (1). El GR se compone de varios elementos estructurales conservados, incluyendo un dominio de unión al ligando carboxiterminal (que también contiene residuos críticos para la dimerización del receptor y la transactivación génica dependiente de hormonas), una región bisagra vecina que contiene señales de localización nuclear, un dominio central de unión al ADN que contiene dedos de zinc y una región variable aminoterminal que participa en la transcripción génica independiente del ligando. En ausencia de hormona, una población significativa de GR se localiza en el citoplasma en una forma inactiva a través de su asociación con proteínas chaperonas reguladoras, como HSP90, HSP70 y FKBP52. Al unirse a la hormona, el GR se libera del complejo de chaperona y se transloca al núcleo como un dímero para asociarse con secuencias específicas de ADN denominadas elementos de respuesta a glucocorticoides (GRE), lo que mejora o reprime la transcripción de genes diana específicos (2). Se ha demostrado que la activación transcripcional mediada por GR se modula mediante fosforilación (3-5). Aunque el GR puede fosforilarse basalmente en ausencia de hormona, se hiperfosforila al unirse a agonistas del receptor. Se ha sugerido que la fosforilación hormonodependiente del GR puede determinar la especificidad del promotor diana, la interacción con cofactores, la intensidad y duración de la señalización del receptor, la estabilidad del receptor y la localización subcelular del receptor (3).
Nombres alternativos
GCCR; GCR; GCRST; variante 1 del receptor nuclear de glucocorticoides; receptor de glucocorticoides; GR; GRL; NR3C1; miembro 1 del grupo C de la subfamilia 3 del receptor nuclear; variante hGR-B(54) del miembro 1 del grupo C de la subfamilia 3 del receptor nuclear; variante hGR-B(77) del miembro 1 del grupo C de la subfamilia 3 del receptor nuclear; variante hGR-B(93) del miembro 1 del grupo C de la subfamilia 3 del receptor nuclear (receptor de glucocorticoides)
Especificación
REACTIVIDAD: HMR Mk
SENSIBILIDAD: Endógena
Peso molecular (kDa): 80, 91, 94
Fuente/Isotipo: IgG de conejo
Order Guidelines
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Collaboration
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