Anticuerpo monoclonal de conejo CST, 37785S, TFEB (D2O7D)

Anticuerpo monoclonal para el estudio de TFEB. Validado para WB, IP, IHC, ChIP, C&R. Disponible en dos tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo TFEB (D2O7D) (CST n.° 37785) está listo para su envío. Información de uso del producto Para obtener resultados óptimos de ChIP, utilice 10 µl de anticuerpo y 10 µg de cromatina (aproximadamente 4 x 10⁻¹ células) por IP. Este anticuerpo se ha validado con los kits de IP de cromatina enzimática SimpleChIP®. La dilución CUT&RUN se determinó con el kit de ensayo CUT&RUN n.º 86652. Western Blot: 1:1000 Inmunoprecipitación: 1:50 Inmunohistoquímica (parafina): 1:300 - 1:1200 IP de cromatina: 1:50 CORTE Y CORRE: 1:50 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Para obtener una versión sin transportador (BSA ni azida) de este producto, consulte el producto n.° 51406. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunoprecipitación, Inmunohistoquímica (Parafina), IP de cromatina, CUT&RUN Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo monoclonal de conejo TFEB (D2O7D) reconoce niveles endógenos de proteína TFEB total. Reactividad de las especies: Humana Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un péptido sintético correspondiente a los residuos que rodean Gly412 de la proteína TFEB humana. Fondo El factor de transcripción EB (TFEB) pertenece a la familia de factores de transcripción bHLH con cremallera de leucina, relacionada con Myc, que impulsa la expresión de una red de genes conocida como la red CLEAR (Expresión y Regulación Lisosomal Coordinada) (1,2). El TFEB reconoce y se une específicamente a las secuencias reguladoras dentro de la caja CLEAR (GTCACGTGAC) de los genes lisosómicos y de autofagia, lo que resulta en la expresión sobrerregulada de genes involucrados en la biogénesis y función de los lisosomas, y la regulación de la autofagia (1,2). El TFEB se activa en respuesta a la privación de nutrientes, estimulando la translocación al núcleo donde forma homo o heterooligómeros con otros miembros de la subfamilia del factor de transcripción de microftalmia (MiTF), lo que resulta en la sobrerregulación de los autofagosomas y lisosomas (3-5). Recientemente, se ha demostrado que TFEB es un componente del complejo 1 de la diana de rapamicina (mTOR) en mamíferos (mTORC1), que regula la fosforilación y la translocación nuclear de TFEB en respuesta a la inanición celular y el estrés (6-9). Durante condiciones normales de crecimiento, TFEB se fosforila en Ser211 de una manera dependiente de mTORC1. La fosforilación promueve la asociación de TFEB con proteínas de la familia 14-3-3 y la retención en el citosol. La inhibición de mTORC1 resulta en una pérdida de la fosforilación de TFEB, la disociación del complejo TFEB/14-3-3 y el transporte rápido de TFEB al núcleo donde aumenta la transcripción de los genes CLEAR y de autofagia (10). También se ha demostrado que TFEB se activa de una manera dependiente de nutrientes por la quinasa p42 MAP (Erk2). El TFEB es fosforilado en Ser142 por Erk2 en respuesta a la privación de nutrientes, lo que produce localización y activación nuclear e indica que otras vías además de mTOR contribuyen a la detección de nutrientes a través de TFEB (3). Nombres alternativos ALPHATFEB; BHLHE35; Proteína básica de hélice-bucle-hélice de clase E 35; Factor de transcripción de células T EB; TCFEB; TFEB; Factor de transcripción EB Especificación REACTIVIDAD: H SENSIBILIDAD: Endógena Peso molecular (kDa): 65-70 Fuente/Isotipo: IgG de conejo