CST, 38662T, anticuerpo monoclonal de conejo fosfo-RIP (Ser321) (E9K2A)

Anticuerpo monoclonal para el estudio de fosfato de ratón RIPK1 (Ser321). Validado para Western Blot, inmunofluorescencia (inmunocitoquímica) y citometría de flujo (fijada/permeabilizada). Disponible en dos tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo Phospho-RIP (Ser321) (E9K2A) (CST n.° 38662) está listo para su envío. Información de uso del producto Western Blot: 1:1000 Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica): 1:400 - 1:800 Citometría de flujo (fijada/permeabilizada): 1:400 - 1:1600 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Para obtener una versión sin transportador (BSA ni azida) de este producto, consulte el producto n.° 33527. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica), Citometría de flujo (fijada/permeabilizada) Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo monoclonal de conejo Phospho-RIP (Ser321) (E9K2A) reconoce niveles endógenos de proteína RIP de ratón solo cuando se fosforila en Ser321. Reactividad de la especie: Ratón Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un fosfopéptido sintético correspondiente a los residuos que rodean a Ser321 de la proteína RIP de ratón. Fondo La familia de proteínas que interactúan con el receptor (RIP) de las serina-treonina quinasas (RIP, RIP2, RIP3 y RIP4) son importantes reguladores del estrés celular que desencadenan respuestas pro-supervivencia e inflamatorias a través de la activación de NF-κB, así como vías pro-apoptóticas (1). Además del dominio quinasa, RIP contiene un dominio de muerte responsable de la interacción con el receptor de dominio de muerte Fas y el reclutamiento a TNF-R1 a través de la interacción con TRADD (2,3). Las células deficientes en RIP muestran una falla en la activación de NF-κB mediada por TNF, lo que hace que las células sean más sensibles a la apoptosis (4,5). RIP también interactúa con los factores asociados al receptor de TNF (TRAFs) y puede reclutar IKK al complejo de señalización TNF-R1 a través de la interacción con NEMO, lo que lleva a la fosforilación y degradación de IκB (6,7). La sobreexpresión de RIP induce tanto la activación de NF-κB como la apoptosis (2,3). La escisión dependiente de la caspasa-8 del dominio de muerte de RIP puede desencadenar la actividad apoptótica de RIP (8). La necroptosis, una vía regulada para la muerte celular necrótica, es desencadenada por una serie de señales inflamatorias, incluyendo citocinas en la familia del factor de necrosis tumoral (TNF), sensores de patógenos como los receptores tipo Toll (TLR) y la lesión isquémica (9,10). El proceso es regulado negativamente por las caspasas y se inicia a través de un complejo que contiene las quinasas RIP y RIP3, típicamente conocido como el necrosoma. La necroptosis es inhibida por un inhibidor de molécula pequeña de RIP, la necrostatina-1 (Nec-1) (11). Los estudios de investigación muestran que la necroptosis contribuye a una serie de condiciones patológicas, y se ha demostrado que Nec-1 proporciona neuroprotección en modelos como la lesión cerebral isquémica (12). RIP se fosforila en varios sitios dentro del dominio quinasa sensibles a Nec-1, como Ser14, Ser15, Ser161 y Ser166 (13). RIP también se fosforila en Ser321 (ratón)/Ser320 (humano) por MAPKAPK-2 (MK-2) y TAK1 en respuesta a señales inflamatorias como TNF-α y LPS (14-17). La fosforilación en este sitio suprime la apoptosis mediada por RIP al inhibir su interacción con FADD y caspasa-8 (14-17). Nombres alternativos Proteína de muerte celular RIP; D330015H01Rik; receptor (TNFRSF)-serina-treonina quinasa 1; proteína 1 que interactúa con el receptor; serina/treonina-proteína quinasa 1 que interactúa con el receptor; Rinp; Rip; RIP-1; Rip1; Ripk1; serina/treonina-proteína quinasa RIP Especificación REACTIVIDAD: M SENSIBILIDAD: Endógena Peso molecular (kDa): 78 Fuente/Isotipo: IgG de conejo