CST, 4083S, DAPI

Colorantes celulares para estudio en el área de investigación. Información de uso del producto Instrucciones de uso: DAPI se suministra como un polvo liofilizado. Para una solución madre de 20 mg/ml, reconstituya 1 mg en 50 µl de agua desionizada o dimetilformamida. Siga los protocolos de IF y flujo recomendados por CST. Para ambas aplicaciones, después de la detección secundaria: Inmunofluorescencia: Realice una contratinción con DAPI como paso final en su procedimiento de tinción. Enjuague las muestras dos veces en PBS durante cinco minutos cada vez. Diluya la solución madre de DAPI a una concentración entre 1 y 0,1 µg/ml en PBS e incube durante 5 minutos a temperatura ambiente en la oscuridad. Enjuague las muestras una vez en PBS y luego prepárelas para la obtención de imágenes. Examine inmediatamente utilizando la longitud de onda de excitación adecuada. Alternativamente, diluya la solución madre de DAPI a una concentración entre 1 y 0,1 µg/ml en medio de montaje, aplíquela a las células y prepárelas para la obtención de imágenes. Examine inmediatamente utilizando la longitud de onda de excitación adecuada. Citometría de flujo: Enjuague las muestras una vez en tampón de incubación. Diluir la solución madre de DAPI a una concentración entre 1,60-0,400 µg/ml en PBS e incubar durante 15 minutos a temperatura ambiente en la oscuridad antes de analizar las células en un citómetro de flujo. Almacenamiento Conservar liofilizado o en solución a 4 °C, desecado. Proteger de la luz. En forma liofilizada, el producto químico es estable durante 24 meses. Una vez en solución, consumir en un plazo de 2 a 3 semanas para evitar la pérdida de potencia. Para almacenamiento a largo plazo, separe y conserve a -20 °C para evitar múltiples ciclos de congelación y descongelación. Fondo El diclorhidrato de 4', 6-diamidino-2-fenilindol (DAPI) es un colorante fluorescente azul del ADN que se dirige a los grupos AT bicatenarios en el surco menor del ADN (1). Una molécula de colorante se une a cada 3 pares de bases del ADN bicatenario y produce una potenciación de la fluorescencia de aproximadamente 20 veces (2). El nivel de fluorescencia del DAPI-ADN es proporcional al contenido de ADN (3). Nombres alternativos colorantes celulares; colorante de ADN