CST, 44807S, anticuerpo monoclonal de conejo DNMT3A isoforma 2 (E1Y5O)

Anticuerpo monoclonal para el estudio de la isoforma 2 de DNMT3A. Validado para Western Blot, inmunoprecipitación e inmunofluorescencia (inmunocitoquímica). Disponible en dos tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo DNMT3A isoforma 2 (E1Y5O) (CST n.° 44807) está listo para su envío. Información de uso del producto Western Blot: 1:1000 Inmunoprecipitación: 1:50 Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica): 1:400 - 1:1600 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunoprecipitación, Inmunofluorescencia (Inmunocitoquímica) Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo monoclonal de conejo DNMT3A isoforma 2 (E1Y5O) reconoce los niveles endógenos de la proteína DNMT3A isoforma 2 (DNMT3A2). Este anticuerpo no presenta reacción cruzada con otras isoformas de DNMT3A ni con otras proteínas DNMT, como DNMT1 y DNMT3B. Reactividad de las especies: Humana Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un péptido sintético correspondiente a los residuos cercanos al extremo amino de la proteína isoforma 2 de DNMT3A humana (DNMT3A2). Fondo La metilación del ADN en los residuos de citosina en células de mamíferos es una modificación epigenética hereditaria crucial para la regulación adecuada de la expresión génica, la impronta genómica y el desarrollo (1,2). Se han identificado tres familias de metiltransferasas del ADN en mamíferos: DNMT1, DNMT2 y DNMT3 (1,2). La DNMT1 se expresa de forma constitutiva en células proliferantes y funciona como una metiltransferasa de mantenimiento, transfiriendo patrones de metilación adecuados al ADN recién sintetizado durante la replicación. La DNMT3A y la DNMT3B se expresan con fuerza en células madre embrionarias, con una expresión reducida en tejidos somáticos adultos. La DNMT3A y la DNMT3B funcionan como metiltransferasas que metilan regiones del ADN previamente no metiladas. La DNMT2 se expresa en niveles bajos en tejidos somáticos adultos, y su inactivación no afecta ni a la metilación del ADN de mantenimiento. DNMT1, DNMT3A y DNMT3B forman conjuntamente un complejo proteico que interactúa con las histonas desacetilasas (HDAC1, HDAC2, Sin3A), las proteínas represoras transcripcionales (RB, TAZ-1) y las proteínas de la heterocromatina (HP1, SUV39H1) para mantener niveles adecuados de metilación del ADN y facilitar el silenciamiento génico (3-8). La metilación inadecuada del ADN contribuye a enfermedades como el cáncer (1,2). La hipermetilación de las islas CpG del promotor dentro de los genes supresores de tumores se correlaciona con el silenciamiento génico y el desarrollo del cáncer. Además, la hipometilación del ADN genómico en masa se correlaciona con la aparición del cáncer y podría contribuir a ella. DNMT1, DNMT3A y DNMT3B se sobreexpresan en muchos tipos de cáncer, incluyendo leucemias mielógenas agudas y crónicas, además de carcinomas de colon, mama y estómago (9-12). Existen al menos dos isoformas proteicas expresadas a partir del locus DNMT3A: la isoforma 1 de DNMT3A (DNMT3A1) y la isoforma 2 de DNMT3A (DNMT3A2). DNMT3A2 se expresa a partir de un promotor intrónico aguas abajo del promotor DNMT3A1 (13,14). Como resultado, los 223 aminoácidos del extremo N-terminal de DNMT3A1 se sustituyen por 24 aminoácidos diferentes presentes en DNMT3A2. Aunque tienen extremos N distintos, ambas isoformas contienen el dominio PWWP necesario para la unión a la lisina 36 de la histona H3 trimetilada (H3K36me3) y el dominio ADD necesario para la unión de la histona y la regulación transcripcional. DNMT3A1 se expresa poco en la mayoría de los tipos de células y tejidos y se localiza en regiones heterocromáticas. La expresión de DNMT3A2 parece estar regulada por el desarrollo y limitada a las células madre embrionarias, donde se localiza en regiones eucromáticas del genoma, lo que sugiere funciones distintas para DNMT3A1 y DNMT3A2. DNMT3A2 es la isoforma predominante responsable de la metilación del ADN en células madre embrionarias. Además, DNMT3A2 está mutado o altamente expresado en varios cánceres diferentes, incluyendo la leucemia mieloide aguda (LMA), el teratocarcinoma, el neuroblastoma y el cáncer de pulmón, testicular, gástrico y de mama (13-17). Nombres alternativos ADN (citosina-5-)-metiltransferasa 3 alfa; ADN (citosina-5)-metiltransferasa 3A; ADN citosina metiltransferasa 3A2; ADN metiltransferasa 3 alfa; ADN metiltransferasa HsaIIIA; ADN MTasa HsaIIIA; DNM3A; DNMT3A; DNMT3A iso2; DNMT3A2; HESJAS; M.HsaIIIA; TBRS Especificación REACTIVIDAD: H SENSIBILIDAD: Endógena Peso molecular (kDa): 95 Fuente/Isotipo: IgG de conejo