CST, 45153T, anticuerpo monoclonal de conejo fosfo-Ezh2 (Thr345) (E7T7K)

Anticuerpo monoclonal para el estudio del fosfato EZH2 (Thr345). Validado para WB, IP, ChIP, ChIP, C&R. Disponible en dos tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo Phospho-Ezh2 (Thr345) (E7T7K) (CST n.° 45153) está listo para su envío. Información de uso del producto Para obtener resultados óptimos de ChIP y ChIP-seq, utilice 10 μL de anticuerpo y 10 μg de cromatina (aproximadamente 4 x 10⁻¹ células) por IP. Este anticuerpo se ha validado con los kits de IP de cromatina enzimática SimpleChIP®. La dilución CUT&RUN se determinó con el kit de ensayo CUT&RUN n.° 86652. Western Blot: 1:1000 Inmunoprecipitación: 1:50 IP de cromatina: 1:50 IP-seq de cromatina: 1:50 CORTE Y CORRE: 1:50 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/mL de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunoprecipitación, IP de cromatina, IP de cromatina-seq, CUT&RUN Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo monoclonal de conejo Fosfo-Ezh2 (Thr345) (E7T7K) reconoce los niveles endógenos de la proteína Ezh2 total solo cuando se fosforila en Thr345. Este anticuerpo puede detectar una banda de origen desconocido alrededor de 135 kDa. Reactividad de las especies: humano, ratón, rata, mono Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un fosfopéptido sintético correspondiente a los residuos que rodean a Thr345 de la proteína Ezh2 humana. Fondo Las proteínas del grupo polycomb (PcG) participan en el mantenimiento del estado silenciado de varios genes regulados por el desarrollo y contribuyen al mantenimiento de la identidad celular, la regulación del ciclo celular y la oncogénesis (1,2). El potenciador del homólogo 2 de zeste (Ezh2), un miembro de esta gran familia de proteínas, contiene cuatro regiones conservadas, incluido el dominio I, el dominio II y un tramo de aminoácidos rico en cisteína que precede al dominio SET carboxiterminal (3). El dominio SET se ha vinculado con la actividad de la histona metiltransferasa (HMTasa). Además, el Ezh2 de mamíferos es miembro de un complejo de histona desacetilasa que funciona en el silenciamiento génico, actuando a nivel de la estructura de la cromatina (4). Los complejos Ezh2 metilan la histona H3 en Lys9 y 27, que se cree que está implicada en la orientación de los reguladores transcripcionales a loci específicos (5). Ezh2 se encuentra desregulado en diversos tipos de tumores, y su función, tanto como efector primario como mediador de la tumorigénesis, ha despertado un creciente interés (6). Ezh2 se fosforila en Thr345 por la quinasa dependiente de ciclina 1 (CDK1), lo que aumenta la orientación de Ezh2 hacia sus loci diana y promueve la metilación de H3 en Lys27 (7,8). Esta forma activada de Ezh2 puede depositar marcas iniciales de H3K27me3 en las hebras hijas de ADN recién sintetizadas durante la replicación (9). Además, la fosforilación de Thr345 afecta la estabilidad de Ezh2 al promover su ubiquitinación y posterior degradación (9). Nombres alternativos potenciador de zeste 2; potenciador de la subunidad 2 del complejo represor polycomb de zeste 2; potenciador del homólogo 2 de zeste; potenciador del homólogo 2 de zeste (Drosophila); ENX-1; ENX1; EZH1; EZH2; EZH2b; Histona-lisina N-metiltransferasa EZH2; KMT6; KMT6A; Lisina N-metiltransferasa 6; MGC9169; WVS; WVS2 Especificación REACTIVIDAD: HMR Mk SENSIBILIDAD: Endógena Peso molecular (kDa): 98 Fuente/Isotipo: IgG de conejo