CST, 4652S, Kit de sustrato PTMScan® Phospho-MAPK/CDK (PXS*P y S*PXK/R)

PTMScan para estudiar en el área de investigación. Información de uso del producto Las células se lisan en un tampón con urea, las proteínas celulares se digieren mediante proteasas y los péptidos resultantes se purifican mediante extracción en fase sólida en fase reversa. A continuación, los péptidos se someten a purificación por inmunoafinidad utilizando un anticuerpo PTMScan® Motif conjugado con perlas de agarosa de proteína A. Los péptidos no unidos se eliminan mediante lavado y los péptidos capturados que contienen PTM se eluyen con ácido diluido. La purificación en fase reversa se realiza en micropuntas para desalinizar y separar los péptidos del anticuerpo antes de concentrar los péptidos enriquecidos para su análisis por LC-MS/MS. CST recomienda el uso del tampón PTMScan® IAP n.° 9993, incluido en el kit. Almacenamiento Las perlas de anticuerpo se suministran en tampón IAP con 50 % de glicerol. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: PTMScan Fondo Las familias MAPK y CDK de las proteínas quinasas de serina/treonina desempeñan un papel importante en la proliferación y el control del ciclo celular. Estas quinasas fosforilan treonina o serina seguida de un residuo de prolina (2-4). La MAPK fosforila sustratos con la secuencia consenso PX(S/T)P, y las CDK fosforilan sustratos con la secuencia consenso (S/T)PXK/R. El mAb de conejo n.° 2325 para sustratos fosfo-MAPK/CDK (PXSP o SPXR/K), incluido en este kit, se desarrolló en el CST para su uso en el estudio y descubrimiento de nuevos sustratos de MAPK y CDK (5,6). En este ensayo, PTMScan (PXS) Nombres alternativos motivo