CST, 4768S, extractos celulares para el control de daños en el ADN

Kit de extracción celular para estudio en el área de investigación. Información de uso del producto Hervir durante 3 minutos antes de usar. Cargar 10 µL de extractos celulares de control de daños del ADN fosforilados y no fosforilados por carril. Almacenamiento Se suministra en tampón de muestra SDS: 62,5 mM Tris-HCl (pH 6,8 a 25 °C), 2 % p/v SDS, 10 % glicerol, 50 mM DTT, 0,01 % p/v azul de bromofenol o rojo de fenol. Conservar a -20 °C o a -80 °C para almacenamiento a largo plazo. Fondo Las quinasas de ataxia telangiectasia mutada (ATM) y relacionadas con ATM y Rad3 (ATR) son miembros de la familia de las quinasas relacionadas con PI3K (PIKK) que fosforilan múltiples sustratos en residuos de serina o treonina, seguidos de glutamina, en respuesta al daño del ADN o a bloqueos de la replicación (1-3). p53 es fosforilada por ATM, ATR y DNA-PK en Ser15. Esta fosforilación altera la capacidad de MDM2 para unirse a p53, promoviendo así la acumulación y activación de p53 en respuesta al daño del ADN (4,5). Chk1 y Chk2, proteínas quinasas dependientes de ATM/ATR, desempeñan un papel importante en el control de los puntos de control del daño del ADN, el desarrollo embrionario y la supresión tumoral (6). Chk1 es fosforilada en Ser280 y Ser296 tras el daño del ADN. El dominio amino-terminal de Chk2 contiene una serie de siete residuos de serina o treonina, incluyendo Thr68, cada uno seguido de glutamina (motivo SQ o TQ). Después del daño del ADN por radiación ionizante (IR), radiación UV o tratamiento con hidroxiurea, Thr68 y otros sitios en esta región son fosforilados por ATM/ATR (7-9). Las proteínas de susceptibilidad al cáncer de mama BRCA1 y BRCA2 se mutan con frecuencia en casos de cánceres hereditarios de mama y ovario y desempeñan papeles en múltiples procesos relacionados con el daño del ADN, la reparación, la progresión del ciclo celular, la transcripción, la ubiquitinación y la apoptosis. Se han identificado numerosos sitios de fosforilación inducidos por daño del ADN en BRCA1, incluyendo la serina 1524, y las quinasas activadas de manera dependiente del ciclo celular, incluyendo Aurora A y CDK2, también pueden fosforilar BRCA1. El daño al ADN inducido por IR, ADN y radiometría también provoca una rápida fosforilación de H2A.X, miembro de la familia de las histonas H2A, en Ser139 por ATM (10,11). Minutos después del daño al ADN, H2A.X fosforilado por Ser139 se localiza en focos subnucleares donde se produjo el daño (12). Nombres alternativos Daño del ADN; extracto; lisado