CST, 51660T, anticuerpo monoclonal de ratón 5-hidroximetilcitosina (5-hmC) (HMC31)

Anticuerpo monoclonal para estudio. Validado para inmunofluorescencia (inmunocitoquímica) y transferencia puntual de ADN. Disponible en dos tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de ratón 5-hidroximetilcitosina (5-hmC) (HMC31) (CST n.° 51660) está listo para su envío. Información de uso del producto Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica): 1:400 Dot Blot de ADN: 1:1000 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica), DNA Dot Blot Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo monoclonal de ratón 5-hidroximetilcitosina (5-hmC) (HMC31) reconoce niveles endógenos de 5-hmC; sin embargo, muchas células y tejidos contienen niveles muy bajos de 5-hmC que pueden estar por debajo de los límites de detección de este anticuerpo. Este anticuerpo se ha validado mediante ensayos ELISA, dot blot y MeDIP y muestra una alta especificidad para la 5-hmC. Reactividad de las especies: Se espera que se presenten todas las especies Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con 5-hidroximetilcitidina. Fondo La metilación del ADN en los residuos de citosina es una modificación epigenética hereditaria crucial para la correcta regulación de la expresión génica, la impronta genómica y el desarrollo de los mamíferos (1,2). La 5-metilcitosina es una marca epigenética represiva establecida por dos enzimas, DNMT3a y DNMT3b, y es mantenida por DNMT1 (3, 4). Originalmente, se creía que la 5-metilcitosina se agotaba pasivamente durante la replicación del ADN. Sin embargo, estudios posteriores han demostrado que las proteínas de translocación diez-once (TET), TET1, TET2 y TET3, pueden catalizar la oxidación de la citosina metilada a 5-hidroximetilcitosina (5-hmC) (5). Además, las proteínas TET pueden oxidar aún más la 5-hmC para formar 5-formilcitosina (5-fC) y 5-carboxilcitosina (5-caC), ambas extirpadas por la timina-ADN glicosilasa (TDG), lo que vincula eficazmente la oxidación de la citosina con la vía de reparación por escisión de bases y favorece la desmetilación activa de la citosina (6,7). La hidroximetilación de la citosina mediada por la proteína TET se demostró inicialmente en el cerebro de ratón y en células madre embrionarias (5, 8). Desde entonces, esta modificación se ha descubierto en muchos tejidos, encontrándose los niveles más altos en el cerebro (9). Aunque la 5-fC y la 5-caC parecen ser especies intermedias de corta vida, cada vez hay más pruebas que demuestran que la 5-hmC es una marca epigenética distintiva con varias funciones únicas (10,11). La base modificada en sí misma es estable in vivo e interactúa con varios lectores, entre ellos MeCP2 (11,12). El nivel global de 5-hmC aumenta durante el desarrollo cerebral y se enriquece en las regiones promotoras y potenciadoras. Además, existe una correlación inversa entre los niveles de 5-hmC y la trimetilación de las histonas H3K9 y H3K27, lo que sugiere un papel de la 5-hmC en la activación génica (12). Se han reportado niveles más bajos de 5-hmC en diversos tipos de cáncer, como la leucemia mieloide y el melanoma (13,14). Especificación REACTIVIDAD: Todas SENSIBILIDAD: Endógena Fuente/Isotipo: IgG1 de ratón