CST, 5438S, anticuerpo fosfohistona H2A.X (Ser139/Tyr142)

Anticuerpo policlonal para el estudio del fosfato H2AX (Ser139/Tyr142). Validado para WB, IP, IF y F. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo contra la fosfohistona H2A.X (Ser139/Tyr142) (CST n.° 5438) está listo para su envío. Información de uso del producto Western Blot: 1:1000 Inmunoprecipitación: 1:50 Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica): 1:100 Citometría de flujo (fijada/permeabilizada): 1:200 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA y 50 % de glicerol. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunoprecipitación, Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica), Citometría de flujo (fijada/permeabilizada) Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo Fosfohistona H2A.X (Ser139/Tyr142) reconoce los niveles endógenos de la proteína histona H2A.X solo cuando está fosforilada en Ser139 o Tyr142, o cuando está fosforilada dualmente en ambos residuos. Este anticuerpo no presenta reacción cruzada con otras histonas. Reactividad de las especies: humano, ratón, rata, mono Fuente / Purificación Los anticuerpos policlonales se producen inmunizando animales con un fosfopéptido sintético correspondiente a los residuos que rodean Ser139 y Tyr142 de la proteína humana H2A.X. Los anticuerpos se purifican mediante cromatografía de afinidad de proteína A y péptidos. Fondo La histona H2A.X es una histona variante que representa aproximadamente el 10% del total de proteínas histonas H2A en fibroblastos humanos normales (1). H2A.X es necesaria para la detención del ciclo celular mediada por puntos de control y la reparación del ADN tras roturas de ADN bicatenario (1). El daño al ADN, causado por radiación ionizante, luz UV o agentes radiomiméticos, resulta en una rápida fosforilación de H2A.X en Ser139 por quinasas similares a PI3K, incluyendo ATM, ATR y DNA-PK (2,3). A los pocos minutos del daño al ADN, H2A.X se fosforila en Ser139 en los sitios de daño del ADN para generar γ-H2A.X (4). Este evento muy temprano en la respuesta al daño del ADN es necesario para el reclutamiento de una multitud de proteínas de respuesta al daño del ADN, incluyendo MDC1, NBS1, RAD50, MRE11, 53BP1 y BRCA1 (1). Además de su función en la reparación del daño del ADN, H2A.X es necesario para la fragmentación del ADN durante la apoptosis y es fosforilada por varias quinasas en respuesta a señales apoptóticas. H2A.X es fosforilada en Ser139 por DNA-PK en respuesta a la activación del receptor de muerte celular, c-Jun N-terminal Kinase (JNK1) en respuesta a la radiación UV-A y p38 MAPK en respuesta a la privación de suero (5-8). H2A.X es constitutivamente fosforilada en Tyr142 en células no dañadas por WSTF (factor de transcripción del síndrome de Williams-Beuren) (9,10). Tras el daño del ADN, y simultáneamente con la fosforilación de Ser139, Tyr142 es desfosforilada en los sitios de daño del ADN por las fosfatasas EYA1 y EYA3 reclutadas (9). Mientras que la fosforilación en Ser139 facilita el reclutamiento de proteínas reparadoras del ADN y proteínas apoptóticas a sitios de daño del ADN, la fosforilación en Tyr142 parece determinar qué conjunto de proteínas se reclutan. La fosforilación de H2A.X en Tyr142 inhibe el reclutamiento de proteínas reparadoras del ADN y promueve la unión de factores proapoptóticos como JNK1 (9). Los fibroblastos embrionarios de ratón que expresan solo el mutante H2A.X Y142F, que favorece el reclutamiento de proteínas reparadoras del ADN sobre las proteínas apoptóticas, muestran una respuesta apoptótica reducida a la radiación ionizante (9). Por lo tanto, parece que el equilibrio de la fosforilación y desfosforilación de H2A.X Tyr142 proporciona un mecanismo de conmutación para determinar el destino celular después del daño del ADN. Nombres alternativos Miembro X de la familia de histonas H2A; Miembro X de la familia de histonas H2A; H2A.X; Histona variante H2A.X; H2a/x; H2AFX; H2AX; Histona H2AX; Histona H2A.x; Histona H2AX Especificación REACTIVIDAD: HMR Mk SENSIBILIDAD: Endógena Peso molecular (kDa): 15 FUENTE: Conejo