Product Description
PTMScan para estudiar en el área de investigación.
Información de uso del producto
Las células se lisan en un tampón con urea, las proteínas celulares se digieren mediante proteasas y los péptidos resultantes se purifican mediante extracción en fase sólida en fase reversa. A continuación, los péptidos se someten a purificación por inmunoafinidad utilizando un anticuerpo PTMScan® Motif conjugado con perlas de agarosa de proteína G. Los péptidos no unidos se eliminan mediante lavado y los péptidos capturados que contienen PTM se eluyen con ácido diluido. La purificación en fase reversa se realiza en micropuntas para desalinizar y separar los péptidos del anticuerpo antes de concentrar los péptidos enriquecidos para su análisis por LC-MS/MS. CST recomienda el uso del tampón PTMScan® IAP n.° 9993, incluido en el kit.
Almacenamiento
Las perlas de anticuerpo se suministran en tampón IAP con 50 % de glicerol. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo.
Protocolo
Protocolos disponibles: PTMScan
Fondo
La fosforilación de tirosina desempeña un papel clave en la señalización celular (2). En el cáncer, la actividad descontrolada de la tirosina quinasa puede impulsar la malignidad y la formación de tumores al generar señales inapropiadas de proliferación y supervivencia (3). Los anticuerpos específicos para la fosfotirosina (4,5) han sido reactivos invaluables en estos estudios. El mAb de ratón para fosfotirosina (P-Tyr-100) n.° 9411, desarrollado por Cell Signaling Technology, proporciona herramientas excepcionalmente sensibles para estudiar la fosforilación de tirosina y monitorizar la actividad de la tirosina quinasa en el descubrimiento de fármacos de alto rendimiento. En este ensayo, PTMScan (Y
Nombres alternativos
motivo; py
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Collaboration
Tony Tang
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