CST, 60566SF, fosfohistona H2A.X (Ser139) (20E3) Anticuerpo monoclonal de conejo (libre de BSA y azida)

Anticuerpo monoclonal para el estudio del fosfato H2AX (Ser139). Validado para WB, IHC, IHC, IF y F. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo Fosfo-Histona H2A.X (Ser139) (20E3) (libre de BSA y azida) (CST n.° 60566) está listo para su envío. Información de uso del producto Este producto es la versión sin portadores del producto n.° 9718. Todos los datos se generaron utilizando el mismo clon de anticuerpo en la formulación estándar, que contiene BSA y glicerol. Esta formulación es ideal para su uso con tecnologías que requieren un marcaje de anticuerpos especializado o personalizado, incluyendo fluoróforos, metales, lantánidos y oligonucleótidos. No se recomienda para ensayos ChIP, ChIP-seq, CUT&RUN o CUT&Tag. Si necesita una formulación sin portadores para la determinación del perfil de cromatina, contáctenos. El usuario final debe determinar las diluciones/concentraciones óptimas. Los anticuerpos sin BSA ni azida se someten a pruebas de control de calidad mediante cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) para determinar la integridad de los anticuerpos. Formulación Se suministra en PBS 1X (10 mM de Na₂HPO₄, 3 mM de KCl, 2 mM de KH₂PO₄ y 140 mM de NaCl (pH 7,8)). Libre de BSA y azida. Para la formulación estándar de este producto, consulte el producto n.° 9718. Almacenamiento Conservar a -20 °C. Este producto se congela a -20 °C, por lo que se recomienda alicuotarlo en viales de un solo uso para evitar múltiples ciclos de congelación/descongelación. Puede presentarse un ligero precipitado que se disuelve agitando suavemente en vórtex. Esto no afectará la eficacia de los anticuerpos. Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo monoclonal de conejo fosfohistona H2A.X (Ser139) (20E3) (libre de BSA y azida) detecta niveles endógenos de H2A.X solo cuando se fosforila en Ser139. Reactividad de las especies: humano, ratón, rata, mono Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un fosfopéptido sintético correspondiente a los residuos que rodean a Ser139 del H2A.X. humano. Fondo La histona H2A.X es una histona variante que representa aproximadamente el 10% del total de proteínas histonas H2A en fibroblastos humanos normales (1). H2A.X es necesaria para la detención del ciclo celular mediada por puntos de control y la reparación del ADN tras roturas de ADN bicatenario (1). El daño al ADN, causado por radiación ionizante, luz UV o agentes radiomiméticos, resulta en una rápida fosforilación de H2A.X en Ser139 por quinasas similares a PI3K, incluyendo ATM, ATR y DNA-PK (2,3). A los pocos minutos del daño al ADN, H2A.X se fosforila en Ser139 en los sitios de daño del ADN para generar γ-H2A.X (4). Este evento muy temprano en la respuesta al daño del ADN es necesario para el reclutamiento de una multitud de proteínas de respuesta al daño del ADN, incluyendo MDC1, NBS1, RAD50, MRE11, 53BP1 y BRCA1 (1). Además de su función en la reparación del daño del ADN, H2A.X es necesario para la fragmentación del ADN durante la apoptosis y es fosforilada por varias quinasas en respuesta a señales apoptóticas. H2A.X es fosforilada en Ser139 por DNA-PK en respuesta a la activación del receptor de muerte celular, c-Jun N-terminal Kinase (JNK1) en respuesta a la radiación UV-A y p38 MAPK en respuesta a la privación de suero (5-8). H2A.X es constitutivamente fosforilada en Tyr142 en células no dañadas por WSTF (factor de transcripción del síndrome de Williams-Beuren) (9,10). Tras el daño del ADN, y simultáneamente con la fosforilación de Ser139, Tyr142 es desfosforilada en los sitios de daño del ADN por las fosfatasas EYA1 y EYA3 reclutadas (9). Mientras que la fosforilación en Ser139 facilita el reclutamiento de proteínas reparadoras del ADN y proteínas apoptóticas a sitios de daño del ADN, la fosforilación en Tyr142 parece determinar qué conjunto de proteínas se reclutan. La fosforilación de H2A.X en Tyr142 inhibe el reclutamiento de proteínas reparadoras del ADN y promueve la unión de factores proapoptóticos como JNK1 (9). Los fibroblastos embrionarios de ratón que expresan solo el mutante H2A.X Y142F, que favorece el reclutamiento de proteínas reparadoras del ADN sobre las proteínas apoptóticas, muestran una respuesta apoptótica reducida a la radiación ionizante (9). Por lo tanto, parece que el equilibrio de la fosforilación y desfosforilación de H2A.X Tyr142 proporciona un mecanismo de conmutación para determinar el destino celular después del daño del ADN. Nombres alternativos Miembro X de la familia de histonas H2A; Miembro X de la familia de histonas H2A; H2A.X; Histona variante H2A.X; H2a/x; H2AFX; H2AX; Histona H2AX; Histona H2A.x; Histona H2AX Especificación REACTIVIDAD: HMR Mk SENSIBILIDAD: Endógena Peso molecular (kDa): 15 Fuente/Isotipo: IgG de conejo