CST, 6222S, SignalSilence® Beclin-1 siRNA I

ARNi para el estudio de Beclin 1 en el área de investigación. Información de uso del producto CST recomienda la transfección con 100 nM de SignalSilence® Beclin-1 siRNA I de 48 a 72 horas antes de la lisis celular. Para el procedimiento de transfección, siga el protocolo proporcionado por el fabricante del reactivo de transfección. No dude en contactar con CST si tiene alguna pregunta sobre su uso. Cada vial contiene el equivalente a 100 transfecciones, lo que corresponde a una concentración final de siRNA de 100 nM por transfección en una placa de 24 pocillos con un volumen total de 300 µl por pocillo. Almacenamiento El ARNi SignalSilence® se suministra en agua sin ARNasa. Separar y almacenar a -20 °C. Fondo La autofagia es un proceso catabólico para la degradación autofagosómica-lisosomal de proteínas activadas en respuesta a la privación de nutrientes y en condiciones neurodegenerativas (1). Una de las proteínas críticas para este proceso es Beclin-1, el ortólogo mamífero de la proteína de autofagia de levadura Apg6/Vps30 (2). Beclin-1 puede complementar defectos en la autofagia de levadura causados ​​por la pérdida de Apg6 y también puede estimular la autofagia cuando se sobreexpresa en células de mamíferos (3). Beclin-1 de mamíferos fue aislado originalmente en una pantalla de dos híbridos de levadura para proteínas que interactúan con Bcl-2 y se ha demostrado que interactúa con Bcl-2 y Bcl-xL, pero no con Bax o Bak (4). Mientras que Beclin-1 es generalmente expresado ubicuamente, estudios de investigación han demostrado que es delecionado monoalélicamente en 40-75% de cánceres de mama y ovario humanos esporádicos (5). Beclin-1 se localiza en estructuras citoplasmáticas, incluyendo las mitocondrias, aunque su sobreexpresión revela cierta tinción nuclear y exportación nuclear dependiente de CRM1 (6). Investigadores han demostrado que los ratones Beclin-1 mueren en etapas tempranas de la embriogénesis y presentan una alta incidencia de tumores espontáneos. Las células madre de los ratones sin expresión muestran una respuesta autofágica alterada, aunque las respuestas a la apoptosis fueron normales (7). Investigadores también han descubierto que la sobreexpresión de Beclin-1 en neuronas infectadas por virus resultó en una protección significativa contra la enfermedad inducida por el virus Sindbis y la apoptosis neuronal (4). Especificación REACTIVIDAD: H