CST, 6286S, SignalSilence® Atg14 siRNA I

ARNi para estudiar ATG14 en el área de investigación. Información de uso del producto CST recomienda la transfección con 100 nM de SignalSilence® Atg14 siRNA I de 48 a 72 horas antes de la lisis celular. Para el procedimiento de transfección, siga el protocolo proporcionado por el fabricante del reactivo de transfección. No dude en contactar con CST si tiene alguna pregunta sobre su uso. Cada vial contiene el equivalente a 100 transfecciones, lo que corresponde a una concentración final de siRNA de 100 nM por transfección en una placa de 24 pocillos con un volumen total de 300 µl por pocillo. Almacenamiento El ARNi SignalSilence® se suministra en agua sin ARNasa. Separar y almacenar a -20 °C. Fondo La autofagia es un proceso catabólico para la degradación autofagosómica-lisosomal del contenido citoplasmático a granel (1,2). La autofagia generalmente se activa por condiciones de privación de nutrientes, pero también se asocia con una serie de procesos fisiológicos, incluyendo el desarrollo, la diferenciación, la neurodegeneración, la infección y el cáncer (3). La maquinaria molecular de la autofagia fue descubierta principalmente en la levadura y está dirigida por una serie de genes relacionados con la autofagia (Atg). Estas proteínas están involucradas en la formación de autofagosomas, vacuolas citoplasmáticas que se entregan a los lisosomas para su degradación. La fosfoinosítido 3-quinasa de tipo III (PI3K) Vps34 regula el tráfico vacuolar y la autofagia (4,5). Múltiples proteínas se asocian con Vps34, incluyendo p105/Vps15, Beclin-1, UVRAG, Atg14 y Rubicon, para determinar la función de Vps34 (6-12). Atg14 y Rubicon se identificaron por su capacidad para unirse a Beclin-1 y participar en complejos únicos con funciones opuestas (9-12). Rubicon, que se localiza en el endosoma y el lisosoma, inhibe la actividad de la quinasa lipídica Vps34; la inhibición de Rubicon mejora la autofagia y el tráfico endocítico (11,12). Por el contrario, Atg14 se localiza en autofagosomas, membranas de aislamiento y RE, y puede mejorar la actividad de Vps34. La inhibición de Atg14 inhibe la autofagia inducida por inanición (11,12). Especificación REACTIVIDAD: H