Control cuantitativo de proteína recombinante CST, 64509S, Cas9 (S. aureus) (6xHis-Tag)

Control de Proteína para el estudio de Cas9 (S. Aureus) en el área de investigación. Información de uso del producto Antes de usar, descongele la proteína recombinante y centrifugue brevemente para recoger todo el líquido del fondo del tubo. Diluya según las siguientes instrucciones, según el tipo de kit ELISA. En la Figura 2 se muestra un ejemplo de curva de sensibilidad. Kits ELISA PathScan®: Diluya con diluyente de muestra ELISA para obtener una concentración de proteína 1X. Kits ELISA PathScan® RP: Diluya con tampón de lisis celular n.° 9803 1X hasta obtener una concentración de proteína 2X para obtener una concentración de proteína final 1X tras la adición del anticuerpo de detección. Kits ELISA FastScan™: Diluya con tampón de extracción celular FastScan™ ELISA 1X hasta obtener una concentración de proteína 2X para obtener una concentración de proteína final 1X tras la adición del cóctel de anticuerpos. Formulación Huésped de expresión: E. coli Suministrado en 10 mM Tris-HCl (pH 7,4), 0,1 mM EDTA, 1 mM DTT, 300 mM NaCl y 50 % (v/v) de glicerol. Almacenamiento Conservar a -20°C. Fondo La proteína 9 asociada a CRISPR (Cas9) es una nucleasa de ADN guiada por ARN y parte del sistema de inmunidad antiviral CRISPR que proporciona inmunidad adaptativa contra material genético extracromosómico (1). El mecanismo de acción antiviral CRISPR implica tres pasos: (i), adquisición de ADN extraño por la bacteria huésped; (ii), síntesis y maduración de ARN CRISPR (ARNcr), seguida de la formación de complejos de proteína ARN-nucleasa Cas; y (iii), interferencia dirigida a través del reconocimiento de ADN extraño por el complejo y su escisión por la actividad de la nucleasa Cas (2). El sistema de inmunidad antiviral CRISPR/Cas tipo II proporciona una herramienta poderosa para la edición precisa del genoma y tiene potencial para la regulación génica específica y aplicaciones terapéuticas (3). La proteína Cas9 y un ARN guía que consiste en una fusión entre un ARNcr y un ARNcr transactivador (ARNtracr) deben introducirse o expresarse en una célula. Una secuencia de 20 nucleótidos en el extremo 5' del ARN guía dirige a Cas9 a un sitio diana específico del ADN. Como resultado, Cas9 puede programarse para cortar diversos sitios de ADN tanto en células como en organismos. Las herramientas de edición genómica CRISPR/Cas9 se han utilizado en numerosos organismos, incluyendo células de ratón y humanas (4,5). Estudios de investigación demuestran que CRISPR puede utilizarse para generar alelos mutantes o genes reporteros en células madre embrionarias de roedores y primates (6-8). Cas9 ( ) es un ortólogo de Cas9 más pequeño, pero tan eficiente, como el ortólogo de Cas9 más comúnmente utilizado, Cas9 ( ) (9). Especificación Peso molecular (kDa): 124