CST, 6620S, SignalSilence® AMPK alfa2 siRNA I

ARNi para el estudio de AMPK-alfa2 en el área de investigación. Información de uso del producto CST recomienda la transfección con 100 nM de SignalSilence® AMPK alfa2 siRNA I de 48 a 72 horas antes de la lisis celular. Para el procedimiento de transfección, siga el protocolo proporcionado por el fabricante del reactivo de transfección. No dude en contactar con CST si tiene alguna pregunta sobre su uso. Cada vial contiene el equivalente a 100 transfecciones, lo que corresponde a una concentración final de siRNA de 100 nM por transfección en una placa de 24 pocillos con un volumen total de 300 µl por pocillo. Almacenamiento El ARNi SignalSilence® se suministra en agua sin ARNasa. Separar y almacenar a -20 °C. Fondo La proteína quinasa activada por AMP (AMPK) está altamente conservada desde la levadura hasta las plantas y animales y desempeña un papel clave en la regulación de la homeostasis energética (1). AMPK es un complejo heterotrimérico compuesto por una subunidad catalítica α y subunidades reguladoras β e γ, cada una de las cuales está codificada por dos o tres genes distintos (α1, 2; β1, 2; γ1, 2, 3) (2). La quinasa se activa por una relación AMP/ATP elevada debido al estrés celular y ambiental, como el choque térmico, la hipoxia y la isquemia (1). El supresor tumoral LKB1, en asociación con las proteínas accesorias STRAD y MO25, fosforila AMPKα en Thr172 en el bucle de activación, y esta fosforilación es necesaria para la activación de AMPK (3-5). La AMPKα también se fosforila en Thr258 y Ser485 (para α1; Ser491 para α2). La quinasa que actúa aguas arriba y la importancia biológica de estos eventos de fosforilación aún no se han dilucidado (6). La subunidad β1 se modifica postraduccionalmente mediante miristoilación y fosforilación en múltiples sitios, incluyendo Ser24/25, Ser96, Ser101, Ser108 y Ser182 (6,7). La fosforilación en Ser108 de la subunidad β1 parece ser necesaria para la activación de la AMPK, mientras que la fosforilación en Ser24/25 y Ser182 afecta la localización de la AMPK (7). Se han identificado varias mutaciones en las subunidades de AMPKγ, la mayoría de las cuales se localizan en los supuestos sitios de unión de AMP/ATP (dominios CBS o Bateman). Las mutaciones en estos sitios reducen la actividad de la AMPK y causan acumulación de glucógeno en el músculo cardíaco o esquelético (1,2). Cada vez hay más evidencia que indica que la AMPK no solo regula el metabolismo de los ácidos grasos y el glucógeno, sino que también modula la síntesis de proteínas y el crecimiento celular a través de las vías EF2 y TSC2/mTOR, así como el flujo sanguíneo a través de la eNOS/nNOS (1). Nombres alternativos ampk-alfa Especificación REACTIVIDAD: H