CST, 7000S, SignalSilence® ULK1 siRNA I

ARNi para estudiar ULK1 en el área de investigación. Información de uso del producto CST recomienda la transfección con 100 nM de SignalSilence® ULK1 siRNA I entre 48 y 72 horas antes de la lisis celular. Para el procedimiento de transfección, siga el protocolo proporcionado por el fabricante del reactivo. No dude en contactar con CST si tiene alguna pregunta sobre su uso. Cada vial contiene el equivalente a 100 transfecciones, lo que corresponde a una concentración final de siRNA de 100 nM por transfección en una placa de 24 pocillos con un volumen total de 300 µl por pocillo. Almacenamiento El ARNi SignalSilence® se suministra en agua sin ARNasa. Separar y almacenar a -20 °C. Fondo Dos quinasas de serina/treonina relacionadas, la quinasa tipo UNC-51 1 y 2 (ULK1, ULK2), fueron descubiertas como homólogas mamíferas del gen en el cual los mutantes exhibieron extensión y crecimiento axonal anormal (1-4). Ambas proteínas se expresan ampliamente y contienen un dominio quinasa amino-terminal seguido de un dominio central rico en prolina/serina y un dominio carboxi-terminal altamente conservado. Las funciones de ULK1 y ULK2 en el crecimiento axonal se han vinculado a estudios que muestran que las quinasas se localizan en los conos de crecimiento neuronal y están involucradas en la endocitosis de factores de crecimiento críticos, como el NGF (5). Estudios de dos híbridos en levadura encontraron que ULK1/2 se asociaba con moduladores de la vía endocítica, SynGAP y sintenina (6). La similitud estructural de ULK1/2 también se ha reconocido con la proteína de autofagia de levadura Atg1/Apg1 (7). Experimentos de silenciamiento con ARNi demostraron que ULK1 es esencial para la autofagia (8), un proceso catabólico para la degradación del contenido citoplasmático masivo (9,10). Parece que Atg1/ULK1 puede actuar como punto de convergencia para múltiples señales que controlan la autofagia (11) y puede unirse a varias proteínas relacionadas con la autofagia (Atg), regulando los estados de fosforilación y el tráfico de proteínas (12-16). ~AMPK, activada en condiciones de bajos nutrientes, fosforila directamente a ULK1 en múltiples sitios, incluyendo Ser317, Ser555 y Ser777 (17,18). Por el contrario, mTOR, que es un regulador del crecimiento celular y un inhibidor de la autofagia, fosforila a ULK1 en Ser757 e interrumpe la interacción entre ULK1 y AMPK (17). Especificación REACTIVIDAD: H