CST, 71630SF, anticuerpo monoclonal de conejo poli/mono-ADP ribosa (E6F6A) (libre de BSA y azida)

Anticuerpo monoclonal para estudio. Validado para Western Blot. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo poli/mono-ADP ribosa (E6F6A) (libre de BSA y azida) (CST n.° 71630) está listo para envío. Información de uso del producto Esta formulación es ideal para tecnologías que requieren el marcaje especializado o personalizado de anticuerpos, incluyendo fluoróforos, metales, lantánidos y oligonucleótidos. No se recomienda para ensayos ChIP, ChIP-seq, CUT&RUN ni CUT&Tag. Si necesita una formulación sin portadores para el perfil de cromatina, contáctenos. El usuario final debe determinar las diluciones/concentraciones óptimas. Los anticuerpos sin BSA ni azida se someten a pruebas de control de calidad mediante cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) para determinar la integridad de los anticuerpos. Formulación Se suministra en PBS 1X (10 mM Na2HPO4, 3 mM KCl, 2 mM KH2PO4 y 140 mM NaCl (pH 7,8)). Libre de BSA y azida. Almacenamiento Conservar a -20 °C. Este producto se congela a -20 °C, por lo que se recomienda alicuotarlo en viales de un solo uso para evitar múltiples ciclos de congelación/descongelación. Puede presentarse un ligero precipitado que se disuelve agitando suavemente en vórtex. Esto no afectará la eficacia de los anticuerpos. Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo monoclonal de conejo poli/mono-ADP ribosa (E6F6A) (libre de BSA y azida) reconoce niveles endógenos de proteínas ribosiladas con ADP y no reacciona de forma cruzada con otras modificaciones postraduccionales. Reactividad de las especies: Se espera que se presenten todas las especies Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con KLH modificado en lisinas con ADP ribosa. Fondo La ADP-ribosilación es una modificación postraduccional que se ha descrito que ocurre en la cadena lateral de varios residuos aceptores (lisina, arginina, glutamato, aspartato, cisteína, serina) y en los extremos amino de las proteínas, así como en el ADN y el ARNt (1). Las ADP-ribosil transferasas (ADPRT) catalizan la transferencia de ADP-ribosa desde β-NAD y liberan nicotinamida en el proceso. Las mono-ADP-ribosil transferasas (MART o monoPARP) constituyen la gran mayoría de las ADPRT. Estas monoenzimas, que incluyen las sirtuinas y muchas de las proteínas PARP (ARTD) y ART, transfieren una sola unidad de ADP-ribosa al residuo diana (MARilación). Las poli-ADP-ribosa polimerasas (poliPARPs) o polienzimas, que incluyen PARP1, 2, 5a y 5b humanas, son las más estudiadas y pueden polimerizar cadenas lineales o ramificadas de hasta ~200 unidades ADPR (2). La especificidad está determinada principalmente, pero no exclusivamente, por un motivo de tríada catalítica no consecutiva, con algunas excepciones. Aquellas que contienen el motivo RSE, como la toxina del cólera, son transferasas dirigidas por arginina, mientras que aquellas que contienen la tríada HYE tienden a exhibir actividad polimerasa (3,4). La ADP-ribosilación es reversible y puede ser degradada a una sola unidad de ADP-ribosa por la poli-ADP-ribosa glicohidrolasa (PARG) o la ADP-ribosilhidrolasa 3 (ARH3) o completamente eliminada del residuo diana por ARH1, TARG1, MacroD1 o MacroD2 (5). La ADP-ribosilación participa en diversos procesos celulares, como la formación del huso mitótico, la descondensación de la cromatina, la respuesta al estrés celular, el silenciamiento retroviral, la biología del ARN y la transcripción. Sin embargo, la función más conocida de las cadenas de ADP-ribosa es la de servir como andamiaje para el reclutamiento de proteínas de reparación del ADN que contienen módulos de unión a PAR en los sitios de daño del ADN (6). La proteína 1 de complementación cruzada de reparación de rayos X (XRCC1), la histona macroH2A1, RNF146 (Iduna), una ubiquitina ligasa E3 y muchas de las propias PARP, entre otras, contienen motivos o dominios de unión a PAR (PBM): WWE, dedo de zinc de unión a PAR (PBZ) o macrodominios (7). La PARilación desempeña un papel fundamental en la supervivencia celular y está estrechamente regulada. La deficiencia de PARP puede dejar a una célula vulnerable a la apoptosis inducida por daño del ADN, mientras que la hiperPARilación puede conducir a parthanatos, una forma única de muerte celular (8). El papel de la PARilación en la reparación del ADN ha inspirado un gran interés en el desarrollo de inhibidores de fármacos candidatos para PARP, en particular para tratar cánceres de mama, próstata y pulmón de células pequeñas con mutaciones en genes de reparación del ADN como BRCA1/2, CHK2 o ATM. Stat1, PERK, p53, G-actina y Ras son solo algunos ejemplos de proteínas que son moduladas funcionalmente por ADP-ribosilación (6,7). La modificación por ADP-ribosa puede bloquear las interacciones de proteínas o, en el caso de P2X7, causar un cambio conformacional que en presencia de la expresión de ART2 sensibiliza a las células T murinas vírgenes al NAD extracelular, lo que conduce a la apoptosis (9). Especificación REACTIVIDAD: Todas SENSIBILIDAD: Endógena Fuente/Isotipo: IgG de conejo