CST, 71652S, Kit de motivo de sustrato PTMScan® Phospho-PKC [(R/K)(R/K)Xp(S/T)X(R/X)]

PTMScan para estudiar en el área de investigación. Información de uso del producto Las células se lisan en un tampón con urea, las proteínas celulares se digieren con proteasas y los péptidos resultantes se purifican mediante extracción en fase sólida en fase reversa. A continuación, los péptidos se someten a purificación por inmunoafinidad utilizando un anticuerpo PTMScan® Motif conjugado con perlas de agarosa de proteína A. Los péptidos no unidos se eliminan mediante lavado y los péptidos capturados con PTM se eluyen con ácido diluido. La purificación en fase reversa se realiza en micropuntas para desalinizar y separar los péptidos del anticuerpo antes de concentrar los péptidos enriquecidos para su análisis por LC-MS/MS. CST recomienda el uso del tampón PTMScan® IAP n.° 9993, incluido en el kit. Almacenamiento Las perlas de anticuerpo se suministran en tampón IAP con 50 % de glicerol. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: PTMScan Fondo Los miembros de la familia de la proteína quinasa C (PKC) participan en varios procesos de transducción de señales, como la secreción, la expresión génica, la proliferación y la contracción muscular, y muchos sustratos de la PKC siguen sin identificarse (1,2). Las isoenzimas de la PKC se subdividen en PKC convencionales (cPKC), PKC nuevas (nPKC) y PKC atípicas (aPKC). Las isoformas PKCα, βI, βII e γ pertenecen al grupo cPKC (1). Cuando se activan, las isoenzimas cPKC fosforilan sustratos que contienen Ser o Thr, con Arg o Lys en las posiciones -3, -2 y +2, y un aminoácido hidrofóbico en la posición +1 (1-3).