CST, 80353T, anticuerpo monoclonal de conejo carbamidometilcisteína (F3T7J)

Anticuerpo monoclonal para estudio. Validado para Western Blot y citometría de flujo (fijado/permeabilizado). Disponible en dos tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo contra carbamidometilcisteína (F3T7J) ​​(CST n.° 80353) está listo para envío. Información de uso del producto Western Blot: 1:1000 Citometría de flujo (fijada/permeabilizada): 1:50 - 1:200 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/mL de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot, Citometría de flujo (Fijada/Permeabilizada) Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo monoclonal de conejo carbamidometilcisteína (F3T7J) ​​reconoce una amplia gama de proteínas y péptidos que contienen cisteína carbamidometilada. Este anticuerpo no presenta reacción cruzada con cisteínas alquiladas con destiobiotina yodoacetamida (DBIA). Reactividad de las especies: Se espera que se presenten todas las especies Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un péptido sintético que contiene cisteína carbamidometilada flanqueada por aminoácidos degenerados en las posiciones N y C-terminales de la cisteína modificada. Fondo La alquilación de cisteína se realiza a menudo con yodoacetamida (IAA) o cloroacetamida (CAA) para generar una modificación carbamidometil (CAM). Debido a que la alquilación ocurre en cisteínas reducidas, las cisteínas con enlaces disulfuro deben tratarse primero con ditiotreitol (DTT) u otro agente reductor. La reacción de alquilación es irreversible. En consecuencia, las cisteínas alquiladas no pueden reasociarse entre sí. Si el grupo sulfhidrilo de una cisteína ya está modificado por otro compuesto, esa cisteína no podrá reaccionar con IAA para formar la modificación carbamidometil. La reacción de alquilación es rápida, aunque la eficiencia puede verse influenciada por el tipo de desnaturalizante utilizado (1). Las proteínas a menudo se derivatizan para evitar la alteración de los enlaces disulfuro que puede conducir a bandas artefóricas en la electroforesis en gel, y para minimizar la inaccesibilidad de las proteasas a las regiones que contienen cisteína, lo que puede limitar la cobertura en la proteómica basada en espectrometría de masas. A la luz de varios estudios que describen posibles reactividades no cisteína de IAA y CAA y que reevalúan la eficacia de dichas reacciones, los usuarios deberían considerar los beneficios de las derivatizaciones de cisteína dependiendo de sus objetivos experimentales específicos (2-4). Especificación REACTIVIDAD: Todas SENSIBILIDAD: Endógena Fuente/Isotipo: IgG de conejo