CST, 8063S, anticuerpo fosfo-NEDD4L (Ser448)

Anticuerpo policlonal para el estudio del fosfato de NEDD4L (Ser448). Validado para Western Blot e inmunoprecipitación. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo Fosfo-NEDD4L (Ser448) (CST n.° 8063) está listo para su envío. Información de uso del producto Western Blot: 1:1000 Inmunoprecipitación: 1:50 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA y 50 % de glicerol. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunoprecipitación Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo fosfo-NEDD4L (Ser448) detecta niveles endógenos de proteína NEDD4L solo cuando se fosforila en Ser448. Reactividad de las especies: Humana Fuente / Purificación Los anticuerpos policlonales se producen inmunizando animales con un fosfopéptido sintético correspondiente a los residuos que rodean la Ser448 de la proteína NEDD4L humana (correspondiente a la Ser477 de ratón o la Ser436 de rata). Los anticuerpos se purifican mediante cromatografía de afinidad con proteína A y péptidos. Fondo La proteína 4 expresada en precursores neuronales y regulada negativamente durante el desarrollo (NEDD4) se identificó originalmente como un gen que se expresa altamente en el sistema nervioso central embrionario temprano del ratón (1). Posteriormente, se definió una familia de proteínas similares a NEDD4 que incluye siete miembros en humanos (2). Las proteínas NEDD4 y similares a NEDD4 (NEDD4L) contienen múltiples dominios funcionales que incluyen un dominio de unión a fosfolípidos y membrana dependiente de calcio (dominio C2), de dos a cuatro dominios de unión a proteínas (dominios WW) y un dominio de ubiquitina-proteína ligasa E3 (dominio HECT). Se ha demostrado que NEDD4 y NEDD4L regulan negativamente tanto los canales de Na dependientes de voltaje neuronales (NaV) como los canales de Na epiteliales (ENaC) en respuesta al aumento de las concentraciones intracelulares de Na (3,4). Los dominios WW de NEDD4 se unen a motivos PY (secuencia de aminoácidos PPXY) que se encuentran en múltiples proteínas NaV y ENaC; La ubiquitinación de estas proteínas está mediada por el dominio HECT de NEDD4 y resulta en su internalización y eliminación de la membrana plasmática. Estudios de investigación han demostrado que la mutación de los motivos PY en las proteínas ENaC está asociada con el síndrome de Liddle, una forma autosómica dominante de hipertensión (5). Además de dirigirse a los canales de sodio, también se ha demostrado que NEDD4L regula negativamente la señalización de TGF-β al dirigirse a Smad2 para su degradación (6). NEDD4 de ratón y humano es escindido rápidamente por proteínas caspasa durante la apoptosis, aunque la importancia de esta escisión no está clara (7). NEDD4L puede ser fosforilada en Ser342 y Ser448 por varios miembros de la familia de quinasas AGC, incluyendo SGK1, Akt y PKA (8-11). La fosforilación en estos sitios inhibe la función de NEDD4L como supresor de ENaC y como regulador de la señalización de TGF-β a través de sus efectos sobre la unión de Smad2/3 (8-11). Nombres alternativos Ligasa de proteína ubiquitina E3 similar a NEDD4; FLJ33870; transferasa de ubiquitina E3 tipo HECT NED4L; hNedd4-2; KIAA0439; NED4L; ligasa de proteína ubiquitina E3 similar a NEDD4; Nedd4-2; NEDD4.2; NEDD4L; NEDL3; expresada en células precursoras neuronales, regulada a la baja durante el desarrollo similar a 4; expresada en células precursoras neuronales, regulada a la baja durante el desarrollo similar a 4; ligasa de proteína ubiquitina E3; expresada en células precursoras neuronales, regulada a la baja durante el desarrollo similar a gen 4; PVNH7; RSP5; ligasa de proteína ubiquitina similar a NEDD4; ligasa de proteína ubiquitina Rsp5 Especificación REACTIVIDAD: H SENSIBILIDAD: Endógena Peso molecular (kDa): 110, 135 FUENTE: Conejo