Product Description
Anticuerpo monoclonal para el estudio del acetilato de H4 (Lys5). Validado para WB, IP, IHC y ChIP. Disponible en dos tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo contra la acetil-histona H4 (Lys5) (D12B3) (CST n.° 8647) está listo para su envío.
Información de uso del producto
Para obtener resultados óptimos de ChIP, utilice 20 µl de anticuerpo y 10 µg de cromatina (aproximadamente 4 x 10⁻¹ células) por IP. Este anticuerpo se ha validado con los kits de IP de cromatina enzimática SimpleChIP®.
Western Blot: 1:1000
Inmunoprecipitación: 1:100
Inmunohistoquímica (parafina): 1:6400
IP de cromatina: 1:25
Almacenamiento
Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Para obtener una versión sin transportador (BSA ni azida) de este producto, consulte el producto n.° 46391.
Protocolo
Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunoprecipitación, Inmunohistoquímica (Parafina), IP de cromatina
Especificidad / Sensibilidad
El anticuerpo monoclonal de conejo acetil-histona H4 (Lys5) (D12B3) reconoce los niveles endógenos de la proteína histona H4 cuando se acetila en Lys5. Este anticuerpo puede presentar reacción cruzada con la histona H4 acetilada en Lys8 o Lys12, pero no con la histona H4 acetilada en Lys16.
Reactividad de las especies: humano, ratón, rata, mono
Fuente / Purificación
El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un péptido sintético correspondiente a los residuos que rodean la Lys5 acetilada de la proteína histona H4 humana.
Fondo
El nucleosoma, compuesto por cuatro proteínas histonas centrales (H2A, H2B, H3 y H4), es el componente principal de la cromatina. Originalmente se creía que funcionaba como un andamiaje estático para el empaquetamiento del ADN, pero ahora se ha demostrado que las histonas son proteínas dinámicas que experimentan múltiples tipos de modificaciones postraduccionales, como la acetilación, la fosforilación, la metilación y la ubiquitinación (1,2). La acetilación de histonas se produce principalmente en los dominios de la cola amino-terminal de las histonas H2A (Lys5), H2B (Lys5, 12, 15 y 20), H3 (Lys9, 14, 18, 23, 27, 36 y 56) y H4 (Lys5, 8, 12 y 16), y es importante para la regulación de la deposición de histonas, la activación transcripcional, la replicación, la recombinación y la reparación del ADN (1-3). La hiperacetilación de las colas de histonas neutraliza la carga positiva de estos dominios y se cree que debilita las interacciones histona-ADN y nucleosoma-nucleosoma, desestabilizando así la estructura de la cromatina y aumentando la accesibilidad del ADN a varias proteínas de unión al ADN (4,5). Además, la acetilación de residuos específicos de lisina crea sitios de acoplamiento para un módulo proteico llamado bromodominio, que se une a los residuos de lisina acetilados (6). Muchas proteínas reguladoras de la transcripción y la cromatina contienen bromodominios y pueden ser reclutadas a promotores génicos, en parte, a través de la unión de colas de histonas acetiladas. La acetilación de histonas está mediada por las acetiltransferasas de histonas (HAT), como CBP/p300, GCN5L2, PCAF y Tip60, que son reclutadas a los genes por factores proteicos unidos al ADN para facilitar la activación transcripcional (3). La desacetilación, que está mediada por las histonas desacetilasas (proteínas HDAC y sirtuinas), revierte los efectos de la acetilación y generalmente facilita la represión transcripcional (7,8).
Nombres alternativos
H4; H4 histona agrupada 1; familia de histonas H4, miembro A; H4-16; H4/A; H4/B; H4/C; H4/D; H4/E; H4/G; H4/H; H4/I; H4/J; H4/K; H4/M; H4/N; H4/O; H4C1; H4C11; H4C12; H4C13; H4C14; H4C15; H4C2; H4C3; H4C4; H4C5; H4C6; H4C8; H4C9; H4F2; H4FA; H4FB; H4FC; H4FD; H4FE; H4FG; H4FH; H4FI; H4FJ; H4FK; H4FM; H4FN; H4FO; HIST1H4A; HIST1H4B; HIST1H4C; HIST1H4D; HIST1H4E; HIST1H4F; HIST1H4H; HIST1H4I; HIST1H4J; HIST1H4K; HIST1H4L; HIST2H4; HIST2H4A; HIST2H4B; HIST4H4; histona 1, H4a; grupo de histonas 1, miembro de la familia H4; grupo de histonas 1, H4a; Histona H4
Especificación
REACTIVIDAD: HMR Mk
SENSIBILIDAD: Endógena
Peso molecular (kDa): 11
Fuente/Isotipo: IgG de conejo
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