CST, 8815S, Kit de detección de Rac1 activo

Kit de ensayo para estudiar Rac1 en el área de investigación. Almacenamiento GTPγS: Almacenar a -80 °C GDP: Almacenar a -80 °C GST-Human PAK1-PBD: Almacenar a -20 °C Rac1 Mouse mAb: Almacenar a -20 °C Tampón de lisis/unión/lavado: Almacenar a 4 °C Resina de glutatión: Almacenar a 4 °C Tampón de muestra SDS: Almacenar a 4 °C Vaso de centrifugación y tubos de recolección: Almacenar a temperatura ambiente Protocolo Protocolos disponibles: Funcional Especificidad / Sensibilidad El kit de detección de Rac1 activo detecta niveles endógenos de Rac1 unido a GTP (activo) como se muestra en la Figura 1. Este kit detecta proteínas de las especies indicadas, según lo determinado a través de pruebas internas, pero también puede detectar proteínas homólogas de otras especies. Las isoformas Rac1a y Rac1b, así como Rac2 y Rac3, son altamente homólogas, por lo que es posible que el anticuerpo reconozca múltiples formas. Reactividad de las especies: humano, ratón Fondo La superfamilia Ras de pequeñas proteínas de unión a GTP (proteínas G) comprende una gran clase de proteínas (más de 150 miembros) que pueden clasificarse en al menos cinco familias según su secuencia y similitudes funcionales: Ras, Rho, Rab, Arf y Ran (1-3). Estas pequeñas proteínas G tienen actividades tanto de unión a GDP/GTP como de GTPasa y funcionan como interruptores binarios en diversos eventos celulares y de desarrollo que incluyen la progresión del ciclo celular, la supervivencia celular, la organización del citoesqueleto de actina, la polaridad y el movimiento celular, y el transporte vesicular y nuclear (1). Una señal aguas arriba estimula la disociación de GDP de la forma unida a GDP (inactiva), lo que conduce a la unión de GTP y la formación de la forma unida a GTP (activa). La proteína G activada luego pasa por un cambio conformacional en su región de unión al efector aguas abajo, lo que conduce a la unión y regulación de los efectores aguas abajo. Esta activación puede ser desactivada por la actividad intrínseca de la GTPasa, que hidroliza el GTP a GDP y libera los efectores posteriores. Estas actividades intrínsecas de intercambio de nucleótidos de guanina e hidrólisis de GTP de las proteínas de la superfamilia Ras también están reguladas por los factores de intercambio de nucleótidos de guanina (GEF) que promueven la formación de la forma activa unida a GTP y las proteínas activadoras de GTPasa (GAP) que devuelven la GTPasa a su forma inactiva unida a GDP (4). Rac y Cdc42 son miembros de la familia Rho-GTPasa. En los mamíferos, Rac existe en tres isoformas, Rac1, Rac2 y Rac3, que son muy similares en secuencia. Rac1 y Cdc42, las más estudiadas de este grupo, se expresan de forma ubicua. Rac2 se expresa en células de origen hematopoyético, y Rac3, aunque se expresa en gran medida en el cerebro, también se encuentra en muchos otros tejidos. Rac y Cdc42 desempeñan funciones clave de señalización en la reorganización del citoesqueleto, el tráfico de membrana, la regulación transcripcional, el crecimiento celular y el desarrollo (5). La unión de GTP estimula la actividad de Rac/Cdc42 y la hidrólisis de GTP a GDP a través de la actividad GTPasa intrínseca de la proteína, volviéndola inactiva. La hidrólisis de GTP es asistida por proteínas activadoras de GTPasa (GAP), mientras que el intercambio de GDP por GTP es facilitado por factores de intercambio de nucleótidos de guanina (GEF). Otro nivel de regulación se logra mediante la unión de RhoGDI, un inhibidor de la disociación de nucleótidos de guanina, que retiene las GTPasas de la familia Rho, incluyendo Rac y Cdc42, en su estado inactivo unido a GDP (6,7). Nombres alternativos 11521; 11522; 11523; 11524; 11525; 11526; 11860; 11894; 8631; 8659; GTPasa