CST, 8820S, Kit de detección de Rho activo

Kit de ensayo para estudiar RhoA en el área de investigación. Almacenamiento GTPγS: Almacenar a -80 °C GDP: Almacenar a -80 °C GST-Rhotekin-RBD: Almacenar a -80 °C Tampón de lisis/unión/lavado: Almacenar a 4 °C Resina de glutatión: Almacenar a 4 °C Tampón de muestra SDS: Almacenar a 4 °C Vaso de centrifugación y tubos de recolección: Almacenar a temperatura ambiente Anticuerpo de conejo Rho: Almacenar a -20 °C Protocolo Protocolos disponibles: Funcional Especificidad / Sensibilidad El kit de detección de Rho activa detecta niveles endógenos de Rho unido a GTP (activo) como se muestra en la Figura 1. Este kit detecta proteínas de las especies indicadas, según lo determinado a través de pruebas internas, pero también puede detectar proteínas homólogas de otras especies. Reactividad de las especies: humano, ratón Fondo La superfamilia Ras de pequeñas proteínas de unión a GTP (proteínas G) comprende una gran clase de proteínas (más de 150 miembros) que pueden clasificarse en al menos cinco familias según su secuencia y similitudes funcionales: Ras, Rho, Rab, Arf y Ran (1-3). Estas pequeñas proteínas G tienen actividades tanto de unión a GDP/GTP como de GTPasa y funcionan como interruptores binarios en diversos eventos celulares y de desarrollo que incluyen la progresión del ciclo celular, la supervivencia celular, la organización del citoesqueleto de actina, la polaridad y el movimiento celular, y el transporte vesicular y nuclear (1). Una señal aguas arriba estimula la disociación de GDP de la forma unida a GDP (inactiva), lo que conduce a la unión de GTP y la formación de la forma unida a GTP (activa). La proteína G activada luego pasa por un cambio conformacional en su región de unión al efector aguas abajo, lo que conduce a la unión y regulación de los efectores aguas abajo. Esta activación puede ser desactivada por la actividad intrínseca de la GTPasa, que hidroliza el GTP a GDP y libera los efectores posteriores. Estas actividades intrínsecas de intercambio de nucleótidos de guanina e hidrólisis de GTP de las proteínas de la superfamilia Ras también están reguladas por los factores de intercambio de nucleótidos de guanina (GEF) que promueven la formación de la forma activa unida a GTP y las proteínas activadoras de GTPasa (GAP) que devuelven la GTPasa a su forma inactiva unida a GDP (4). Las GTPasas pequeñas de la familia Rho, que incluyen Rho, Rac y cdc42, actúan como interruptores moleculares, regulando procesos como la migración celular, la adhesión, la proliferación y la diferenciación. Son activadas por los factores de intercambio de nucleótidos de guanina (GEF), que catalizan el intercambio de GDP unido por GTP, e inhibidas por las proteínas activadoras de GTPasa (GAP), que catalizan la hidrólisis de GTP a GDP. Un tercer nivel de regulación lo proporciona la unión estequiométrica del inhibidor de la disociación de Rho GDP (RhoGDI) (5). RhoA, RhoB y RhoC presentan una alta homología, pero parecen tener funciones biológicas divergentes. Las modificaciones en el extremo carboxiterminal y las diferencias en la localización subcelular permiten que estas tres proteínas respondan y actúen sobre moléculas de señalización distintas (6,7). Nombres alternativos 11521; 11522; 11523; 11524; 11525; 11526; 11856; 11860; 8789; GTPasa