CST, 8953S, Alexa Fluor® 555 Faloidina

Colorantes celulares para estudio en el área de investigación. Información de uso del producto Para preparar una solución madre 100X, reconstituya el material liofilizado en 100 µl de DMSO anhidro. Fije las células durante 15 minutos con formaldehído al 4 % fresco y sin metanol, y luego enjuague tres veces en PBS durante 5 minutos cada vez. Una vez fijadas, siga el protocolo CST para inmunotinción. Después de la incubación de los anticuerpos primarios y secundarios, Alexa Fluor ® 555 Phalloidin se puede diluir 1:100 (1 µl por 100 µl de volumen de ensayo) en PBS y agregar a las células. Deje incubar durante 15 minutos a temperatura ambiente y luego enjuague una vez con PBS. Cubra los portaobjetos con el reactivo ProLong Gold Antifade y examine la muestra utilizando la longitud de onda de excitación adecuada. Nota: La información de uso de este producto ha cambiado a partir del 1 de septiembre de 2024. Las recomendaciones anteriores eran usar metanol o DMSO como disolvente para la liofilización del material; Ahora se recomienda utilizar SÓLO DMSO. Almacenamiento Este material se presenta como un sólido liofilizado estable durante un año a -20 °C, desecado y protegido de la luz. Los conjugados de faloidina deben reconstituirse en DMSO anhidro para preparar soluciones madre; consulte las instrucciones de uso para obtener más información. Una vez reconstituidas en DMSO, las soluciones madre son estables durante un año a -20 °C. La estabilidad en soluciones acuosas es baja, por lo que el conjugado solo debe estar en presencia de una solución acuosa durante la incubación con células. Fondo La actina, una proteína eucariota ubicua, es el componente principal del citoesqueleto. Se conocen al menos seis isoformas en mamíferos. La β- y la γ-actina no muscular, también conocida como actina citoplasmática, se expresan predominantemente en células no musculares, controlando la estructura y la motilidad celular (1). La actina existe principalmente como un polímero fibroso, la F-actina. En respuesta a las señales de reorganización del citoesqueleto durante procesos como la citocinesis, la endocitosis o el estrés, la cofilina promueve la fragmentación y despolimerización de la F-actina, lo que resulta en un aumento de la forma globular monomérica, la G-actina (2). La faloidina es un péptido bicíclico tóxico natural que se encuentra en la seta venenosa, Amanita phalloides, y que se une rápidamente a la F-actina con fuerte afinidad (3). Nombres alternativos Alexa Fluor Faloidina; lexa Fluor 555 Faloidina; Faloidina