CST, 92657T, Fosfo-NeuroD1 (Ser274) (F3C7A) Anticuerpo monoclonal de conejo

Anticuerpo monoclonal para el estudio del fosfato de NEUROD1 (Ser274). Validado para WB, WB, IP, IF e IF. Disponible en dos tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo Phospho-NeuroD1 (Ser274) (F3C7A) (CST n.° 92657) está listo para su envío. Información de uso del producto Western Blot: 1:1000 Western Simple™: 1:10 - 1:50 Inmunoprecipitación: 1:100 Inmunofluorescencia (congelada): 1:50 Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica): 1:100 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/mL de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunoprecipitación, Inmunofluorescencia (Congelada), Inmunofluorescencia (Inmunocitoquímica) Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo monoclonal de conejo Fosfo-NeuroD1 (Ser274) (F3C7A) reconoce los niveles endógenos de la proteína NeuroD1 solo cuando se fosforila en Ser274. Este anticuerpo no presenta reacción cruzada con otros sitios de fosforilación de NeuroD1. La reactividad de la especie para inmunofluorescencia es solo en ratones. Reactividad de las especies: humano, ratón, rata Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un fosfopéptido sintético correspondiente a los residuos que rodean a Ser274 de la proteína NeuroD1 humana. Fondo El factor de diferenciación neurogénica 1 (NeuroD1) pertenece a la familia de factores de transcripción hélice-bucle-hélice básicos (bHLH). Estas proteínas funcionan formando heterodímeros con proteínas E y uniéndose a la secuencia canónica de la caja E CANNTG (1,2). La actividad neuronal produce la fosforilación de NeuroD1 en Ser336, mediada por CaMKII, necesaria para la formación y el crecimiento de las dendritas (3,4). NeuroD1 también se fosforila en Ser274, aunque los resultados dependen del contexto, ya que la fosforilación por Erk estimula la actividad de NeuroD1 en las células β pancreáticas, mientras que la fosforilación por GSK-3β inhibe a NeuroD1 en las neuronas (3). NeuroD1 es crucial tanto para el páncreas como para el sistema nervioso en desarrollo y desempeña un papel importante en el desarrollo del oído interno y la retina de los mamíferos (3). Los ratones que carecen de NeuroD1 desarrollan diabetes grave y mueren poco después del nacimiento debido a defectos en la diferenciación de las células β (2,3,5,6). La falta de NeuroD1 en el cerebro provoca graves defectos del desarrollo (5). Las mutaciones humanas se han vinculado a diversos tipos de diabetes, como la diabetes mellitus tipo 1 y la diabetes de inicio en la madurez en jóvenes (1,3). La actividad de la quinasa Erk1/2 se ve estimulada por la entrada de glucosa y calcio en las células beta pancreáticas, y la posterior fosforilación de NeuroD1 en Ser274 promueve la transcripción del gen de la insulina (7,8). El NeuroD1 fosforilado en el páncreas se transloca cada vez más al núcleo, donde interactúa directamente con el promotor de la insulina (9). El NeuroD1 nuclear activo actúa en sinergia con Pdx1 para activar la insulina, NKX2.2 y la transcripción del polipéptido amiloide de los islotes (IAPP), a la vez que suprime la transcripción de somatostatina impulsada por Pdx1 (10,11). En la glándula pineal de rata en desarrollo, la fosforilación de NeuroD1 en Ser274 y Ser336 está estrechamente correlacionada con la localización nuclear de NeuroD1, y el transporte citoplasmático a nuclear de la proteína está bajo control adrenérgico cíclico diurno y nocturno (12). En células 293T, la transfección de un mutante Ser274Ala no fosforilable bloqueó la ubiquitinación de NeuroD1 y la degradación proteasomal (13). La localización de NeuroD1 fosforilado se invierte en estas células en comparación con las células beta pancreáticas, con un fosfo-imitador de Ser274Glu localizado principalmente en el citoplasma en las primeras, evidencia adicional de la naturaleza específica del contexto de esta modificación. (13). Nombres alternativos factor de transcripción básico hélice-bucle-hélice; transactivador de caja E de células beta 2; BETA2; BHF-1; BHLHA3; proteína básica hélice-bucle-hélice 3 de clase A; MODY6; NDF1; NEUROD; NEUROD1; diferenciación neurogénica 1; factor de diferenciación neurogénica 1; proteína neurogénica hélice-bucle-hélice NEUROD; diferenciación neuronal 1; diabetes tipo 2 Especificación REACTIVIDAD: HMR SENSIBILIDAD: Endógena Peso molecular (kDa): 49 Fuente/Isotipo: IgG de conejo