Product Description
Anticuerpo monoclonal para el estudio de Smad3. Validado para WB, IP, IF, F, ChIP y ChIP. Disponible en 3 tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo SMAD3 (C67H9) (CST n.° 9523) está listo para su envío.
Información de uso del producto
Para obtener resultados óptimos de ChIP y ChIP-seq, utilice 10 µl de anticuerpo y 10 µg de cromatina (aproximadamente 4 x 10⁻¹ células) por IP. Este anticuerpo se ha validado con los kits de IP de cromatina enzimática SimpleChIP®.
Western Blot: 1:1000
Inmunoprecipitación: 1:100
Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica): 1:100 - 1:200
Citometría de flujo (fijada/permeabilizada): 1:100
IP de cromatina: 1:50
IP-seq de cromatina: 1:50
Almacenamiento
Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Para obtener una versión sin transportador (BSA ni azida) de este producto, consulte el producto n.° 44223.
Protocolo
Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunoprecipitación, Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica), Citometría de flujo (fijada/permeabilizada), IP de cromatina, IP de cromatina-seq
Especificidad / Sensibilidad
El mAb de conejo SMAD3 (C67H9) detecta niveles endógenos de la proteína SMAD3 total. No se detectó reactividad cruzada con otros miembros de la familia.
Reactividad de las especies: humano, ratón, rata, mono
Fuente / Purificación
El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un péptido sintético correspondiente a los residuos que rodean a Leu207 del SMAD3 humano.
Fondo
Los miembros de la familia SMAD de moléculas de transducción de señales son componentes de una vía intracelular crítica que transmite señales de TGF-β desde la superficie celular hasta el núcleo. Se han definido tres clases distintas de SMAD: los SMAD regulados por receptor (R-SMAD), que incluyen SMAD1, 2, 3, 5 y 9; el SMAD de mediador común (co-SMAD), SMAD4; y los SMAD antagonistas o inhibidores (I-SMAD), SMAD6 y 7 (1-5). Los receptores de tipo I activados se asocian con R-SMAD específicos y los fosforilan en un motivo SSXS carboxiterminal conservado. Los R-SMAD fosforilados se disocian del receptor y forman un complejo heteromérico con SMAD4, iniciando la translocación del complejo SMAD heteromérico al núcleo. Una vez en el núcleo, los SMAD reclutan diversas proteínas de unión al ADN que regulan la actividad transcripcional (6-8). Después de la estimulación por TGF-β, Smad2 y Smad3 se fosforilan en sus extremos carboxilo (Ser465 y 467 en Smad2; Ser423 y 425 en Smad3) por el receptor I de TGF-β. Smad 2/3 fosforilado puede formar complejos con Smad4, translocarse al núcleo y regular la expresión genética (9-11).
Nombres alternativos
DKFZp586N0721; DKFZp686J10186; hMAD-3; hSMAD3; HSPC193; HsT17436; JV15-2; LDS1C; LDS3; Homólogo 3 de MAD; Homólogo de mad JV15-2; Homólogo de proteína mad; MAD, madres contra el homólogo decapentapléjico 3; Mad3; MADH3; MGC60396; Madres contra el homólogo decapentapléjico 3; Madres contra el homólogo 3 de DPP; Proteína 3 relacionada con SMA y MAD; SMAD 3; Miembro 3 de la familia SMAD; SMAD, madres contra el homólogo 3 de DPP; SMAD3
Especificación
REACTIVIDAD: HMR Mk
SENSIBILIDAD: Endógena
Peso molecular (kDa): 52
Fuente/Isotipo: IgG de conejo
Order Guidelines
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