CST, 9601S, anticuerpo con motivo de unión a fosfo-(Ser) 14-3-3

Anticuerpo policlonal para estudio. Validado para WB, IP, IHC y E. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo con motivo de unión a fosfo-(Ser) 14-3-3 (CST n.° 9601) está listo para su envío. Información de uso del producto Western Blot: 1:1000 Inmunoprecipitación: 1:50 Inmunohistoquímica (parafina): 1:100 ELISA de péptidos (DELFIA): 1:500 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA y 50 % de glicerol. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunoprecipitación, Inmunohistoquímica (Parafina) Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo con motivo de unión a fosfo-(Ser) 14-3-3 se une a péptidos y proteínas que contienen un motivo compuesto de fosfo-Ser con prolina en la posición +2 y arginina o lisina en la posición -3. La unión del anticuerpo es fosfoespecífica y en gran medida independiente de otros aminoácidos circundantes. Este anticuerpo reacciona débilmente de forma cruzada con secuencias que contienen fosfo-Thr en lugar de fosfo-Ser en este motivo, y con secuencias que contienen fosfo-Ser rodeada de Phe en la posición +1 y Arg/Lys en la posición -3. No se observa reactividad cruzada con las secuencias no fosforiladas correspondientes ni con otros motivos que contienen fosfo-Thr/Ser/Tyr. Mediante ELISA, este anticuerpo reconoce una amplia gama de péptidos que contienen el motivo de unión 14-3-3, y mediante análisis Western blot en gel 2D reconoce un gran número de presuntas proteínas de unión a 14-3-3. Reactividad de las especies: Se espera que se presenten todas las especies Fuente / Purificación Los anticuerpos policlonales se producen inmunizando animales con péptidos sintéticos que contienen el motivo de unión a la fosfo-(Ser) 14-3-3. Los anticuerpos se purifican mediante cromatografía de afinidad con proteína A y péptidos. Fondo Las proteínas 14-3-3 son una familia altamente conservada de proteínas involucradas en la regulación de la supervivencia celular, apoptosis, proliferación y control de puntos de control (1-5). La regulación biológica por 14-3-3 está mediada a través de interacciones proteína-proteína dependientes de la fosforilación (6). Dos motivos diferentes que contienen fosfo-Ser se encuentran en casi todas las proteínas de unión a 14-3-3 conocidas (7). El motivo 1 (Arg/Lys y Ser en las posiciones -3 y -2, fosfo-Ser en la posición 0 y Pro en la posición +2) se encuentra en proteínas reguladoras críticas que incluyen Bad, cdc25C, FKHRL1, PKC y c-Raf (5,7). Los anticuerpos policlonales y monoclonales (4E2) con motivo de unión a fosfo-(Ser) 14-3-3 proporcionan herramientas poderosas para el descubrimiento y la caracterización de posibles proteínas de unión a 14-3-3 que contienen este motivo y para el descubrimiento de fármacos de alto rendimiento. Especificación REACTIVIDAD: Todas SENSIBILIDAD: Endógena FUENTE: Conejo