CST, 96708S, Panel de citometría de flujo de marcadores de células T esenciales humanas

Kit de ensayo para estudiar CD3epsilon/Granzima B/CD8A/FOXP3/CD4 en el área de investigación. Información de uso del producto Todos los anticuerpos de este kit son compatibles con el kit de fijación/permeabilización de FoxP3/Factor de Transcripción n.° 43481 y pueden utilizarse en una sola mezcla de tinción en células fijadas y permeabilizadas. Antes de la fijación y la incubación con los anticuerpos, recomendamos añadir un colorante de viabilidad fijable, como el Ghost Dye Violet 510, para permitir la identificación y la exclusión de células muertas del análisis. Estrategia de selección para identificar subgrupos esenciales de linfocitos T: Si se utilizó un colorante de viabilidad fijable, primero se seleccionan las células viables. A continuación, se seleccionan los linfocitos según la dispersión frontal y la dispersión lateral. Los linfocitos T auxiliares convencionales son las células CD3+CD4+ dentro de la selección de linfocitos. Los linfocitos T reguladores CD3+CD4+ expresan positivamente FoxP3. Los linfocitos T citotóxicos convencionales son las células CD3+CD8+ dentro de la selección de linfocitos. Tanto CD3+CD4+ como CD3+CD8+ pueden expresar positivamente la molécula citotóxica granzima B. Almacenamiento Los anticuerpos anti-CD3 (UCHT1) de ratón (conjugado PE), anti-CD4 (RPA-T4) de ratón (conjugado violetFluor™ 450) y anti-CD8α (RPA-T8) de ratón (conjugado PE-Cy7®) se suministran en NaH₂PO₃ 10 mM, NaCl 150 mM, NaN₃ al 0,09 %, gelatina al 0,1 %, pH 7,2. Los anticuerpos anti-FoxP3 (D6O₃C) de conejo (conjugado Alexa Fluor® 488) y anti-Granzima B (D2H₂F) de conejo (conjugado Alexa Fluor® 647) se suministran en PBS (pH 7,2), azida sódica inferior al 0,1 % y 2 mg/ml de BSA. Conservar a 4 °C. No alicuotar los anticuerpos. Proteger de la luz. No congelar. Todos los componentes de este kit son estables según la fecha impresa en la etiqueta del envase exterior cuando se almacenan a la temperatura recomendada. Consulte las etiquetas, fichas técnicas o páginas web del producto para conocer la fecha de caducidad específica de cada componente. Protocolo Protocolos disponibles: Citometría de flujo (fijada/permeabilizada) Especificidad / Sensibilidad Cada anticuerpo del panel de citometría de flujo de marcadores de linfocitos T humanos esenciales detecta los niveles endógenos de su proteína diana. El anticuerpo monoclonal de ratón CD3 (UCHT1) (conjugado PE) detecta un epítopo en el dominio extracelular de la proteína CD3ε. El anticuerpo monoclonal de ratón CD4 (RPA-T4) (conjugado violetFluor 450) y el anticuerpo monoclonal de ratón CD8 alfa (RPA-T8) (PE-Cy7) Reactividad de las especies: Humana Fuente / Purificación Los anticuerpos monoclonales se purificaron a partir del sobrenadante de cultivo tisular mediante cromatografía de afinidad. Los anticuerpos purificados se conjugaron en condiciones óptimas, eliminando el colorante no reaccionado de la preparación.