Anticuerpo monoclonal de conejo CST, 9733S, trimetilhistona H3 (Lys27) (C36B11)

Anticuerpo monoclonal para el estudio del trimetilato de H3 (Lys27). Validado para WB, IHC, IF, F, ChIP, ChIP, C&R, C&T. Disponible en 3 tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo trimetilhistona H3 (Lys27) (C36B11) (CST n.° 9733) está listo para su envío. Información de uso del producto Para obtener resultados óptimos de ChIP y ChIP-seq, utilice 10 µl de anticuerpo y 10 µg de cromatina (aproximadamente 4 x 10⁻¹ células) por IP. Este anticuerpo se ha validado con los kits de IP de cromatina enzimática SimpleChIP®. La dilución CUT&RUN se determinó con el kit de ensayo CUT&RUN n.° 86652. La dilución CUT&Tag se determinó con el kit de ensayo CUT&Tag n.° 77552. Western Blot: 1:1000 IHC Leica Bond: 1:200 - 1:800 Inmunohistoquímica (parafina): 1:100 - 1:400 Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica): 1:800 - 1:3200 Citometría de flujo (fijada/permeabilizada): 1:100 - 1:400 IP de cromatina: 1:50 IP-seq de cromatina: 1:50 CORTE Y CORRE: 1:50 CORTE Y ETIQUETA: 1:50 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/ml de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Para obtener una versión sin transportador (BSA ni azida) de este producto, consulte el producto n.° 35861. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot, IHC Leica Bond, Inmunohistoquímica (parafina), Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica), Citometría de flujo (fijada/permeabilizada), IP de cromatina, IP de cromatina-seq, CUT&RUN, CUT&Tag Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo monoclonal de conejo trimetilhistona H3 (Lys27) (C36B11) detecta niveles endógenos de histona H3 solo cuando está trimetilada en Lys27. Este anticuerpo no presenta reacción cruzada con Lys27 no metilada, monometilada ni dimetilada. Además, este anticuerpo no presenta reacción cruzada con la histona H3 monometilada, dimetilada o trimetilada en Lys4, Lys9 y Lys36, ni con la histona H4 en Lys20. Reactividad de las especies: humano, ratón, rata, mono Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un péptido sintético correspondiente al extremo amino de la histona H3 en el que Lys27 está trimetilada. Fondo El nucleosoma, compuesto por cuatro proteínas histonas centrales (H2A, H2B, H3 y H4), es el componente principal de la cromatina. Originalmente se creía que funcionaba como un andamiaje estático para el empaquetamiento del ADN, pero ahora se ha demostrado que las histonas son proteínas dinámicas que experimentan múltiples tipos de modificaciones postraduccionales, como la acetilación, la fosforilación, la metilación y la ubiquitinación (1). La metilación de histonas es un determinante principal para la formación de regiones activas e inactivas del genoma y es crucial para la correcta programación del genoma durante el desarrollo (2,3). La metilación de arginina en las histonas H3 (Arg2, 17, 26) y H4 (Arg3) promueve la activación transcripcional y está mediada por una familia de proteínas arginina metiltransferasas (PRMT), que incluyen los coactivadores PRMT1 y CARM1 (PRMT4) (4). En contraste, se ha identificado un conjunto más diverso de histonas lisina metiltransferasas, todas menos una de las cuales contienen un dominio catalítico SET conservado originalmente identificado en las proteínas Su(var)3-9, Enhancer of zeste y Trithorax. La metilación de la lisina ocurre principalmente en las histonas H3 (Lys4, 9, 27, 36, 79) y H4 (Lys20) y se ha implicado tanto en la activación transcripcional como en el silenciamiento (4). La metilación de estos residuos de lisina coordina el reclutamiento de enzimas modificadoras de la cromatina que contienen módulos de unión a metil-lisina, como los cromodominios (HP1, PRC1), los dedos PHD (BPTF, ING2), los dominios Tudor (53BP1) y los dominios WD-40 (WDR5) (5-8). El descubrimiento de las desmetilasas de histonas, como PADI4, LSD1, JMJD1, JMJD2 y JHDM1, ha demostrado que la metilación es un marcador epigenético reversible (9). Nombres alternativos H3; Histona agrupada H3 1; Familia de histonas H3, miembro A; H3/A; H31; H3C1; H3C10; H3C11; H3C12; H3C2; H3C3; H3C4; H3C6; H3C7; H3C8; H3FA; H3FB; H3FC; H3FC HIST1H3C; H3FD; H3FF; H3FH; H3FI; H3FJ; H3FK; H3FL; HIST1H3A; HIST1H3B; HIST1H3C; HIST1H3D; HIST1H3E; HIST1H3F; HIST1H3G; HIST1H3H; HIST1H3I; HIST1H3J; histona 1, H3a; grupo de histonas 1 Miembro de la familia H3 a; grupo de histonas 1, H3a; Histona H3; Histona H3.1; Histona H3/a; Histona H3/b; Histona H3/c; Histona H3/d; Histona H3/f; Histona H3/h; Histona H3/i; Histona H3/j; Histona H3/k; Histona H3/l Especificación REACTIVIDAD: HMR Mk SENSIBILIDAD: Endógena Peso molecular (kDa): 17 Fuente/Isotipo: IgG de conejo