Anticuerpo monoclonal de conejo CST, 98399T, histona H3 (mutante específico K36M) (E8N1L)

Anticuerpo monoclonal para el estudio de la mutación H3F3A (Lys36Met). Validado para Western Blot, inmunofluorescencia (inmunocitoquímica) e IP de cromatina. Disponible en dos tamaños. Altamente específico y rigurosamente validado internamente, el anticuerpo monoclonal de conejo para histona H3 (K36M mutante específico) (E8N1L) (CST n.° 98399) está listo para su envío. Información de uso del producto Para obtener resultados óptimos de ChIP, utilice 10 μL de anticuerpo y 10 μg de cromatina (aproximadamente 4 x 10⁻¹ células) por IP. Este anticuerpo se ha validado con los kits de IP de cromatina enzimática SimpleChIP®. Western Blot: 1:1000 Inmunofluorescencia (inmunocitoquímica): 1:1600 - 1:6400 IP de cromatina: 1:50 Almacenamiento Se suministra en 10 mM de HEPES sódico (pH 7,5), 150 mM de NaCl, 100 µg/mL de BSA, 50 % de glicerol y menos del 0,02 % de azida sódica. Conservar a -20 °C. No alicuotar el anticuerpo. Protocolo Protocolos disponibles: Western Blot, Inmunofluorescencia (Inmunocitoquímica), IP de cromatina Especificidad / Sensibilidad El anticuerpo monoclonal de conejo para la histona H3 (K36M mutante específica) (E8N1L) reconoce niveles endógenos de las proteínas H3.1, H3.2 y H3.3 mutantes de K36M. El anticuerpo puede mostrar una ligera reactividad cruzada con las histonas H3.1, 3.2 o 3.3 de tipo silvestre cuando se utiliza en altas concentraciones. Puede ser necesaria una titulación cuidadosa de este anticuerpo para obtener una especificidad óptima. Este anticuerpo puede detectar una banda de origen desconocido a 50 kDa. Reactividad de las especies: humano, ratón Fuente / Purificación El anticuerpo monoclonal se produce inmunizando animales con un péptido sintético correspondiente a la secuencia mutante K36M de la proteína histona H3.3 humana. Fondo El condroblastoma es un tipo raro de tumor benigno que se encuentra en los extremos redondeados de los huesos largos de brazos y piernas. Se ha descubierto que más del 90% de los condroblastomas contienen una mutación heterocigótica en el gen que codifica la variante de histona H3.3 (1). Esta mutación, una sustitución del aminoácido lisina por metionina en el codón 36 (K36M), inhibe al menos dos metiltransferasas de la lisina 36 de la histona H3, WHSC1 (MMSET) y SETD2, lo que resulta en una reducción de los niveles globales de metilación de la lisina 36 de la histona H3 (1). Los condrocitos que contienen la mutación K36M de la histona H3 presentan varias características distintivas de las células cancerosas, incluyendo una mayor capacidad para formar colonias, resistencia a la apoptosis y defectos en la diferenciación. La reducción de los niveles globales de metilación en los condrocitos, resultante de la mutación K36M, contribuye a la tumorogénesis al alterar la expresión de genes asociados al cáncer. La mutación K36M de la histona H3 también promueve la sarcomagénesis al afectar la diferenciación de las células progenitoras mesenquimales, lo que resulta en sarcomas indiferenciados (2). La mutación K36M altera el panorama de metilación de las histonas, lo que resulta en una ganancia en la metilación de la lisina 27 de la histona H3 a nivel genómico, la redistribución del complejo represor 1 de Polycomb y la desrepresión de sus genes diana, conocidos por bloquear la diferenciación mesenquimal. Finalmente, la mutación K36M de la histona H3 también se encuentra en el 13% de los carcinomas de células escamosas de cabeza y cuello negativos al VPH, contribuyendo nuevamente a la tumorogénesis al alterar los niveles globales de metilación de la lisina 36 de la histona H3 (3). Nombres alternativos miembro 3A de la familia de histonas H3; histona H3, familia 3A; histona H3, familia 3B (H3.3B); H3-3A; H3-3B; H3.3 histona A; H3.3A; H3.3B; H33; H3F3; H3F3A; H3F3B; Histona H3.3 Especificación REACTIVIDAD: HM SENSIBILIDAD: Endógena Peso molecular (kDa): 17 Fuente/Isotipo: IgG de conejo